如何选择最亮的荧光染料?荧光亮度排行来啦!

 

荧光染料是细胞生物学等科学研究中不可或缺的重要工具,荧光滤色块是荧光显微镜中至关重要的一个部件。我们大家在操作荧光染料亮度的时候,我们可以按照上面的比较方法去比较荧光染料的亮度,那么一般荧光染料亮度怎么进行比较?

 

荧光染料的亮度可以用来比较不同荧光染料的荧光标记效果,通过阴性细胞群与阳性细胞群的荧光信号之间的关系来表示。但阴性细胞群的荧光信号受到信号强度、自发荧光、非特异性染色、仪器的电子噪声等多个因素相关。

 

荧光染料染色指数是阳性细胞群的平均荧光强度与阴性细胞群的平均荧光强度之差与阴性细胞群荧光强度标准差之间比值的一半。荧光染料染色系数只和抗体克隆与质量、荧光团纯度与质量、荧光修饰比、激光线及其功率、长通和带通滤光片、目的细胞等因素相关。

 

荧光染料的染色指数与荧光染料的亮度呈正相关,也就是荧光染料亮度越高,染色系数也就高。

 

DNA染料:

 

Cell Navigator™脂质液滴荧光测定试剂盒

图1.Cell Navigator™脂质液滴荧光测定试剂盒(Cat#22735)和Nuclear Green™LCS1(Cat#17540)染色的油酸处理过的HeLa细胞的荧光图像。

 

染料名称 标记部位 激光 滤光片组 亮度
DAPI(17510) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Blue(17548) DNA 355 nm DAPI 6
Nuclear Green(17540) DNA 488 nm FITC 6
Nuclear Orange(17541) DNA 488 nm Cy3 6
Propidium Iodide(17515) DNA 532 nm Texas Red 3
Nuclear Red(17542) DNA 633 nm Cy5.5 6

 

细胞增殖染料

 

细胞增殖染料

图2.CytoTell™GreenCFSE进行的细胞增殖测定。在第0天,用CytoTell™Green或CFSE对Jurkat细胞(〜2×106细胞/ mL)进行染色。在指定的那天,以1:1的比例连续通过细胞。在通过当天,在FITC通道中用ACEA NovoCyte 3000流式细胞仪测量荧光强度。连续几代人以不同的颜色代表。

 

染料名称 功能 激光 滤光片 亮度
CytoTell Blue(22251) 增殖 405 nm DAPI 6
CFSE(22022) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Green(22253) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Orange(22257) 增殖 488 nm Cy3/TRITC 7
CytoTell UltraGreen(22240) 增殖 488 nm FITC 7
CytoTell Red 590(22261) 增殖 561 nm Cy3 7
CytoTell Red 650(22255) 增殖 633 nm Cy5 7

 

细胞活力检测染料

 

细胞活力检测染料

图3.用CytoCalcein Violet 500(Cat#22013)染色的活HeLa细胞图像。细胞核用Hoechst 33342(Blue,Cat#17535)染色。

 

染料名称 功能 激光 滤光片 亮度
Calcein Blue(22006) 细胞活力 405 nm DAPI 6
Calcein UltraBlue(21908) 细胞活力 405 nm DAPI 6
CytoCalcein Violet 450(22012) 细胞活力 405 nm DAPI 7
CytoCalcein Violet 500(22013) 细胞活力 405 nm FITC 7
Calcein(22001) 细胞活力 488 nm FITC 7
Calcein Orange(22008) 细胞活力 488 nm TRITC 7
Calcein UltraGreen(21905) 细胞活力 488 nm FITC 7
7-AAD(17501) 细胞活力 532 nm Cy5 2
Calcein Red(21900) 细胞活力 561nm Cy3/TRITC 7
Calcein Deep Red(21902) 细胞活力 633 nm Cy5 7

 

荧光标记染料

 

荧光标记染料 

图4.将 HeLa细胞与(Tubulin +)或不与(Tubulin-)小鼠抗微管蛋白一起孵育,然后与iFluor™488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,左)或AlexaFluor®488山羊抗小鼠IgG缀合物(绿色,右)。细胞核用Hoechst 33342(蓝色)染色。

 

染料名称 功能 激光 滤光片 亮度
Alexa Fluor 350 标记 355 nm DAPI 2
iFluor 350(1020) 标记 355 nm DAPI 6
iFluor 450(1026) 标记 405 nm FITC 5
Pacific Green 标记 405 nm FITC 5
Pacific Orange 标记 405 nm TRITC 2
iFluor 405(1021) 标记 405 nm DAPI 6
iFluor 430(1052) 标记 405 nm FITC 6
Pacific Blue(570) 标记 405 nm DAPI 2
Alexa Fluor 555 标记 488 nm TRITC 4
Cy3(141) 标记 488 nm TRITC 4
Alexa Fluor 488(1812) 标记 488 nm FITC 5
FITC 标记 488 nm FITC 7
iFluor 488(1023) 标记 488 nm FITC 7
Oregon Green 标记 488 nm FITC 7
TRITC 标记 488 nm TRITC 7
PE-Alexa Fluor 594 标记 488 nm Texas Red 9
PE-Alexa Fluor 750 标记 488 nm Cy7 9
PE-iFluor 594(2584) 标记 488 nm Texas Red 9
PE-iFluor 750(2578) 标记 488 nm Cy7 9
PE(2558) 标记 488 nm TRITC 10
PE-Alexa Fluor 647 标记 488 nm Cy5 7
PE-Cy5(2610) 标记 488 nm Cy5.5 10
PE-Cy5.5(2613) 标记 488 nm Cy5.5 7
PE-Cy7(2616) 标记 488 nm Cy7 10
PE-iFluor 647(2577) 标记 488 nm Cy5 10
PE-Texas Red(2619) 标记 488 nm Texas Red 10
Alexa Fluor 555(1821) 标记 532 nm TRITC 5
Alexa Fluor 532(1819) 标记 532 nm TRITC 7
iFluor 514(1024) 标记 532 nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 532(1025) 标记 532 nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 546(1048) 标记 532 nm Cy3/TRITC (590/40) 7
Alexa Fluor 594(1830) 标记 561 nm Texas Red 6
iFluor 610(1038) 标记 561 nm Texas Red (610/40) 6
Texas Red(480) 标记 561 nm Texas Red 6
iFluor 555(1028) 标记 561 nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 568(1049) 标记 561 nm Cy3/TRITC (590/40) 7
iFluor 594(1029) 标记 561 nm Texas Red (610/40) 7
Alexa Fluor 750(1839) 标记 633 nm Cy7 4
iFluor 750(1037) 标记 633 nm Cy7 (780/60) 4
iFluor 680(1035) 标记 633 nm Custom (712/25) 5
Alexa Fluor 680(1835) 标记 633 nm Cy5.5 6
Alexa Fluor 700(1836) 标记 633 nm Cy7 6
Cy7(290) 标记 633 nm Cy7 6
iFluor 647(1031) 标记 633 nm Cy5 (660/40) 6
iFluor 660(1032) 标记 633 nm Cy5 (660/40) 6
iFluor 700(1036) 标记 633 nm Custom (712/25) 6
Alexa Fluor 647(1833) 标记 633 nm Cy5 7
Cy5(151) 标记 633 nm Cy5 7
iFluor 633(1030) 标记 633 nm Cy5 (660/40) 7
APC-Alexa Fluor 750 标记 633 nm Cy7 8
APC-Cy5.5(2622) 标记 633 nm Cy5.5 8
APC-Cy7(2625) 标记 633 nm Cy7 5
APC-iFluor 700(2570) 标记 633 nm Cy7 8
APC-iFluor 750(16908) 标记 633 nm Cy7 8
APC(2554) 标记 633 nm Cy5 9
iFluor 790(1368) 标记 633 nm Cy7 (780/60) 3
iFluor 800(1379) 标记 633 nm Custom (840/20) 3
iFluor 810(1389) 标记 633 nm Custom (840/20) 3
iFluor 820(1399) 标记 633 nm Custom (840/20) 3
iFluor 860(1409) 标记 633 nm Custom (885/40) 3

 

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