染细胞（一）：专染细胞膜的荧光染料

为什么要做细胞染色实验？

为了更直观的观测细胞的变化、动态，细胞器的相互作用等，研究细胞或细胞器的功能指标、疾病相关模型等。

我们知道利用荧光染料对细胞膜进行标记和示踪的成像技术是研究细胞膜结构和功能的重要手段，那么请问：哪些常见的染料可以用于细胞膜染色？

细胞膜作为细胞的边界可将细胞内部与外环境分隔开。不仅为细胞提供了相对稳定的内环境，并参与了包括物质运输、信号转导、细胞凋亡和细胞自噬在内的许多重要生理活动。其中DiI、DiO、DiD、DiR等是最常见的细胞膜染料，这些都可以在Abbkine的官网上都可以查询的到，品质保障、货期还短。

请解释下，DiI、DiO、DiD、DiR这些细胞膜染料的区别与联系？

DiI、DiO、DiD、DiR染料是一族亲脂性的荧光染料，可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。该系列染料进入细胞膜后，会在整个细胞膜上侧向扩散，在最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。当其与细胞膜结合后其荧光强度大大增强，有着很高的淬灭常数和激发态寿命。由于该类染料各具特有的荧光颜色，因此可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。但值得注意的是：该系列染料能标记细胞膜而不破坏其功能，并且能持续更长时间，但如果发生膜融合则可能会染上其他细胞。此外，它们还会在透化过程中丢失。

该系列染料区别如下：

货号	名称	荧光颜色	溶解性	应用
BMD00071	DiI (DiIC18(3))	橙色荧光	可溶于DMSO、DMF和乙醇。	• DiI被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂，通常不会影响细胞的生存力。• DiI除了最简单的细胞膜荧光标记外，还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移，通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散，检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
BMD00072	DiO(DiOC18(3))	绿色荧光	可溶于乙醇。	• DiO被广泛用于正向或逆向的，活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂,通常不会明显影响细胞的生存力，对于细胞膜染色的荧光强度通常要低于DiI，有时对于某些经过固定的组织的染色效果欠佳。• 还可以用于检测细胞的融合和粘附，检测发育或移植过程中细胞迁移。
BMD00073	DiD (DiIC18(5))	红色荧光	可溶于DMSO、DMF或乙醇。	• DID染料的染色效率高，均一，不易猝灭，无明显细胞毒性，且受自身荧光背景干扰小。• 目前DID已成功应用于多种细胞的体内示踪研究，如Treg细胞、间充质干细胞、肿瘤细胞、造血干祖细胞等。
BMD00074	DiR (DiIC18(7))	深红色荧光	可溶于DMSO、DMF或乙醇。	• DiR的红外荧光可以穿透细胞和组织，在活体成像中用来示踪。常用于标记细胞质膜。两个18-碳链插入到细胞膜，从而特定的、稳定的细胞染色，几乎不会发生细胞间的染料转移。可以用乙醇配置其储存液。• DiR 染色后可进行多聚甲醛（不可使用甲醇等其他试剂）的固定，但不建议在染色后进行透化的过程。