全新α-突触核蛋白（α-Synuclein）-助力帕金森病研究

帕金森病（Parkinson’s disease, PD）是最为流行的突触核蛋白病（synucleinopathy），也是全球第二大常见的神经退行性疾病，影响着大约2%的60岁以上人群，发病率仅次于阿尔茨海默病。α-突触核蛋白是帕金森病的发病机制中最重要的蛋白，因为它是路易小体的主要结构成分，α-突触核蛋白聚集与路易小体的形成及多巴胺能神经元的死亡密切相关。

 

生理状态突触核蛋白包括包括α-突触核蛋白（α-syn）、β-突触核蛋白（β-syn）和γ- 突触核蛋白（γ-syn）三种类型。α-突触核蛋白单体由三部分组成：（1）氨基端：4个不完全重复序列的区域，是家族性PD基因突变的好发部位；（2）羧基端： 35个氨基酸残基序列，包含两个不完全重复的序列，具有很强的β折叠趋向，这些趋向是某些位点突变后造成突触核蛋白单体之间聚集的重要原因。（3）NAC：区富含带负电荷的酸性氨基酸，可以和重金属结合发生聚集。

 

α-突触核蛋白在各种因素的影响下异常表达和聚集，这一过程产生的氧化应激等生化反应和寡聚体中间构像等均在帕金森发病过程中起着重要的作用。生理状态的α-突触核蛋白为无序单体，病理状态的突触核蛋白为聚合状态，即毒性α-突触核蛋白。

 

 

上图是α-突触核蛋白聚集体（PFFs）的形成过程，我们的活性聚集体具有催化突触核蛋白单体聚集形成活性聚集体的作用，我们称之为“种子”，突触核蛋白单体在正常人体内就存在着，而在帕金森病人的大脑中这些单体聚集成了突触核蛋白聚集体，连同其他一些蛋白形成了路易小体，沉淀在大脑中，使脑细胞死亡。

 

目前市面上的α-突触核蛋白均是无活性的，我们的活性聚集体可以模拟帕金森疾病模型，助力帕金森疾病的研究。

 

产品优势：StressMarq 研发出可以直接注射到活体内产生病理反应的活性α-突触核蛋白纤维原，该方法制作疾病模型的时间要远远短于传统的基因改造小鼠、大鼠。通常注射后30天即可见到病理反应，而基因改造模型需要9个月到1年时间。

 

两种α-突触核蛋白聚集检测方法：

 

硫黄素T检测：硫黄素T (Thioflavin T) 是一种荧光染料，可以和富含β折叠的结构结合，例如α-突触核蛋白纤维原、Tau纤维原等。一旦结合，硫黄素T的发射光谱就会发生红移 ，并且荧光强度会增强，这是一个很好的用来检测纤维原形成的测试。

 

 

活性突触核蛋白 (α-Syn) 聚合体 (SPR-322) 催化活性单体(SPR-321)形成新的聚合体.

 

左侧硫黄素 T 发射光曲线展示了四种试验对象随时间增强的荧光强度(相关于α-Syn 蛋白聚合体),其中 10 nM 活性 α-Syn 聚合体(SPR-322) 与100 μm 活性 α-Syn 单体 (SPR-321) 混合物荧光增强最明显, 另外几组对比分别是活性 α-Syn 聚合物 (SPR-322) 、活性 α-Syn 单体 (SPR-321) 以及 Thioflavin T λex = 450 nm, λem = 485 nm.

 

细胞检测：以下是使用被活性和对照α-突触核蛋白前体纤维原(PFFs)处理的神经元获取ICC的图片。活性α-突触核蛋白PFFs处理的原代大鼠海马体神经元显示了路易体的形成，而经对照α-突触核蛋白处理的神经元没有出现路易体形成。

 

 

D-F：被活性小鼠突触核蛋白聚集体(SPR-324) 4 µg/ml处理后显示路易体内含物（绿色）的形成以及细胞减少，

A-C：被无活性的对照突触核蛋白聚集体，处理时没有路易体内含物形成及细胞减少. 

 

组织: 原代海马体神经元(DIV16). 物种: 斯普拉-道来氏大鼠. 固定: 由PFA制作的3% 甲醛固定20分钟. 阻断: 1:1 PBS:LiCOR Odyssey Block (LiCOR, 927-40010) 以及 30 mL/mL, 0.1% triton-X 100 阻断 30 分钟. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗体 (1:1000), 以及兔抗pSer129 (1:800), 4°C下处理24 小时. 二抗: ATTO 546 驴抗小鼠 (1:700) 和 ATTO 488 驴抗兔 (1:700) 室温下孵育一小时 (复合图绿色). 复染色: Hoechst (蓝色) 细胞核染色, 1:3000 室温下孵育1小时. 细胞定位: 路易体内含物. 放大倍数: 20x.

 

 

D-F：原代大鼠海马体神经元被活性突触核蛋白聚集体(SPR-322) 4 µg/ml处理后显示路易体内含物（绿色）的形成

A-C：被对照突触核蛋白聚集体(SPR-317) 4 µg/ml处理时没有路易体内含物形成.

 

组织: 原代海马体神经元. 物种: 斯普拉-道来氏大鼠. 固定: 由PFA制作的4% 甲醛. 一抗: 小鼠抗pSer129 抗体, 稀释度 1:1000, 4°C下处理24 小时. 二抗: FITC 羊抗小鼠 (绿色) 稀释度 1:700室温下孵育1小时. 复染色: Hoechst (蓝色) 细胞核染色, 1:4000 室温下孵育1小时. 细胞定位: 路易体内含物. 放大倍数: 20x.

 

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StressMarq研发的，针对α-突触核蛋白单体、聚集体及多应用，多种属相关抗体：

 

 

*以上蛋白提供100ug ,200ug,500ug，抗体提供12ug, 100ug等不同规格的包装，满足您多样化的需求。

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厂家内部质检：

 

StressMarq Biosciences Inc. 在2007年成立于加拿大维多利亚，是一家生物科技公司，专门从事试剂与试剂盒研究，服务范围遍及全球50多个国家。

 

StressMarq公司的核心技术领域为细胞应激（尤其是热休克蛋白（HSP）领域，领先全球），离子通道，载体研究，同时在神经科学领域推出特有的具有生物活性的Tau蛋白与a-突触核蛋白。产品领域涉及到：细胞凋亡、细胞信号、通路和转运、细胞器标志物、热休克、神经生物学、神经科学、氧化应激、磷酸化运输等。

 

除了提供用于进一步研究的相关工具外，StressMarq还提供全新的尖端研究工具，用于开发新的生物项目，包括全球独一无二的a B晶体蛋白ELISA试剂盒（现在是公认的乳腺癌标志物）；热休克同源蛋白70（Hsc70）ELISA试剂盒；以及用于神经衰退研究的Tau活性蛋白与a-突触核蛋白。

 

本公司已将专业技术扩展到抗体、小分子离子通道与载体等更新领域，前者包括当前热门的核心领域：Nav、Cav、TRP、Kv、KCNQ、HCN，后者包括当前热门的核心领域：ENaC、NCC和NKCC2以及主要水通道蛋白载体。

 

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