细胞凋亡——TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒解决方案

 

细胞死亡是生命现象不可逆停止及生命的结束,正常的组织中经常发生细胞死亡,是维持组织机能和形态所必须的,而在其中,细胞凋亡的过程是细胞死亡中的研究热门课题,让我们一起随着专家的脚步探索细胞凋亡的前世今生。

 

小羽:各位现在看到的是我们《细胞访谈》特别节目。本期节目我们有幸请到了一位特殊的嘉宾。他是除了病毒之外,构成自然界生物体的最小的基本功能单位—细胞,同时也是细胞家族中研究生老病死的资深专家。现在让我们用掌声有请这位特殊的嘉宾!

 

细胞凋亡

 

小细专家:Hi,大家好,很荣幸受邀参与本次访谈节目,也非常高兴大家对于细胞家族的关注。

 

小羽:看来小细专家,不仅博学漂亮,还很谦虚呢。那接下来正式开始本期访谈了。首先第一个问题:我们都知道您是研究细胞生老病死方面的专家,可否请您给我们介绍一下,细胞死亡的原因及方式有哪些呢?

 

小细专家:好的,谢谢小羽!细胞死亡是生命现象不可逆停止及生命的结束,正常的组织中经常发生细胞死亡,是维持组织机能和形态所必须的,常见的细胞死亡原因及方式主要有以下几种:

 

自杀 生物体发育过程中普遍存在着由宿主决定的细胞自觉有序的死亡现象,当细胞遇到内、外环境因子刺激时,主动启动基因调控的自杀保护措施,通过这种方式去除体内非必需细胞或即将发生特化的细胞。 细胞凋亡 是细胞的一种生理性、主动性的“自觉自杀行为”。
细胞自噬 一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,送入溶酶体(动物)或液泡(酵母和植物)中进行降解并得以循环利用
失巢凋亡 由与细胞外基质和其他细胞脱离接触而诱发的一种形式的细胞程序死亡
他杀 免疫系统发现并清除异物、外来病原微生物、处死病变细胞等引起内环境波动的因素,粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞等通过多种方式来处死一些细胞来维持系统内环境稳定。 吞噬死亡 免疫细胞既可以吞噬感染的病毒、细菌或其它一些颗粒,也可以吞噬对衰老的、进入编程死亡的细胞
意外死亡 细胞遭遇到异常的物理、化学及生物因素影响,有的细胞会当即毙命,有的会选择一些奇葩的死法,细胞意外死亡会带来炎症反应和机体功能障碍。 细胞坏死 细胞受到化学因素(如强酸、强碱、有毒物质)、物理因素(如热、辐射)和生物因素(如病原体)等环境因素的伤害,引起细胞死亡的现象;
并入死亡 即有些细胞会进入到其它细胞中,然后死亡。
兴奋性中毒 谷氨酸酯及其类似物质等神经递质的过度刺激,使神经细胞受损及死忘的病理过程;
非典型性死亡 当细胞凋亡不能正常发生而细胞必须死亡时,细胞采用一些不同于典型的凋亡和坏死的细胞死亡方式的“替补”方案,这些死亡方式不依赖半胱氨酸家族蛋白酶路径,可引发炎症反应在内的重要生理功能。 细胞焦亡 一种微生物感染等引起的程序性细胞死亡方式,其特征为依赖于半胱天冬酶-1,并伴有大量促炎症因子的释放。
细胞胀亡 细胞肿胀,体积增大,胞浆空泡化,肿胀波及细胞核、内质网、线粒体等胞内结构,胞膜起泡,细胞膜完整性破坏。

 

生存还是死亡,其实细胞家族每天都在做着这样的选择——不仅是选择是否死去,还选择了如何死去。由于时间有限,除以上的方式外,其他的细胞死亡的方式就不给大家介绍了!

 

小羽:谢谢小细专家的讲述。那我们本次节目的主题是“走近凋亡细胞的晚年生活”。这里请您给我们解读一下细胞凋亡的过程。

 

小细专家:细胞凋亡是1973年Kerr和Wyllin 最先提出这一概念。细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段:接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→进入连续反应过程;

 

细胞凋亡的过程

 

细胞处于不同的凋亡阶段具有不同的生物学特征,典型的特征包括:1)细胞膜PS(磷脂酰丝氨酸)外翻;2)线粒体膜电位丧失;3)细胞核浓缩和断裂。此外在各个不同的时期:

细胞处于不同的凋亡阶段具有不同的生物学特征

 

小羽:我们知道细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同,请问我们是如何检测晚期时的细胞特征呢?

 

小细专家:细胞凋亡晚期,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3'-OH形成,很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,在细胞凋亡的研究中被广泛采用。

 

小羽:您有什么推荐的产品,能够很好的用与细胞凋亡晚期的检测吗?

 

小细专家:Abbkine的TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒提供实验所需的全套试剂组分以及优化的实验方案,适用于荧光酶标仪、荧光显微镜、流式细胞仪。适用于样品类型:贴壁细胞,悬浮细胞,石蜡包埋组织切片,冰冻切片。其产品列表如下:

产品名称 货号
TUNEL凋亡检测试剂盒 (绿色荧光) KTA2010
TUNEL凋亡检测试剂盒 (橙色荧光) KTA2011

 

TUNEL凋亡检测试剂盒

小羽:好的,非常感谢小细专家的倾情解读,有需要细胞凋亡晚期检测的朋友,可以咨询Abbkine进一步了解TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒的详细信息。同时再次感谢小细专家的到来,本期节目到此结束,下周同一时间,请继续收看!

 

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