核因子红细胞2相关因子（Nrf2）是一种转录因子，它通过与抗氧化应答元件（ARE）区域的启动子结合，增加抗氧化蛋白的表达，以协调细胞的抗氧化和抗炎反应。在正常情况下，Nrf2被细胞骨架中的Kelch样ECH关联蛋白1（Keap1）保留在细胞质中，并促进Nrf2的泛素化和降解。人体内的氧化和抗氧化体系通常处于动态平衡状态。然而，当这种平衡被打破时，机体可能面临过度氧化负荷，导致抗氧化物质耗竭或活性下降，进而使过多的活性氧自由基攻击靶器官，对组织器官和生物大分子（如DNA、RNA、蛋白质和脂质）造成损伤。
通常情况下，Nrf2定位于细胞质，并与Keap1相互作用。在泛素化后，Nrf2被迅速降解通过泛素蛋白酶体途径。然而，当细胞受到氧化应激时，Keap1蛋白域的结构发生变化，导致Nrf2从Keap1中释放出来。这使得Nrf2蛋白无法被降解，从而使其进入细胞核，并结合到ARE上，诱导抗氧化应答基因的转录表达，以保护细胞免受氧化损伤。
研究表明，通过使用小分子抑制剂直接阻断KEAP1-NRF2蛋白-蛋白相互作用，可以调节抗氧化基因的表达，预防正常细胞的恶变，并发挥抗癌作用。这种方法有潜力用于开发新的抗癌治疗策略。
艾美捷科技作为BPS Bioscience中国区代理，为您推荐KEAP1-NRF2相互作用的小分子抑制剂筛选，助力抗癌药物的研究与开发：
Keap1-Nrf2抑制剂筛选试剂盒旨在利用荧光偏振（fluorescence polarization，FP）技术，通过监测荧光标记分子与配体结合时的旋转运动性变化，来鉴定Keap1-Nrf2结合抑制剂。FP是一种用于研究分子相互作用的强大工具。该试剂盒包含足够量的纯化Keap1蛋白、荧光标记Nrf2肽和用于100个结合反应的试剂缓冲液。为了确定抑制剂对Keap1-Nrf2复合物形成的影响，将Keap1蛋白和荧光Nrf2肽与或不与测试抑制剂一起孵育30分钟。使用能够测量荧光偏振的多功能微孔酶标仪测量Nrf2肽的旋转运动性变化。
| 货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
| 72020 | Keap1-Nrf2抑制剂筛选试剂盒
KEAP1-Nrf2 Inhibitor Screening Assay Kit |
96reactions | 非常适合研究酶动力学和筛选药物发现和高通量应用的小分子抑制剂 |
结果赏析：
左图：Keap1与Nrf2的结合。右图：Nrf2抑制剂抑制Keap1-Nrf2结合。
结合情况使用Keap1:Nrf2抑制剂筛选试剂盒（BPS Bioscience #72020）进行检测。Nrf2抑制剂KI696与Nrf2肽和Keap1在逐渐增加的浓度下孵育。荧光偏振度在λex 485nm，λem 530 nm下使用荧光偏振的多功能微孔酶标仪测量。
文献案例：
在这项研究中，报道了一种新的6-shogaol衍生物（shogaol噻吩化合物（STC）），通过多种机制（KEAP1独立和依赖）改善了其NRF2活性，降低了与巯基的反应性（可能改善了其生物作用的选择性并减少了毒性），并在肝脏微粒体中具有代谢稳定性。使用可重复使用的催化剂（脯氨酸-脯氨酸二肽）采用新的合成方法，在良好的产率（>85%）和纯度（~95%）下合成了STC。STC具有良好的药物样性质和生物活性，优于6-shogaol。与6-shogaol相比，STC表现出更显著的抗炎作用，通过NRF2依赖和NRF2非依赖机制（未来的研究应进一步阐明这一方面）。在该研究中，他们就是用的BPS Bioscience Keap1-Nrf2相互作用的抑制剂筛选试剂盒来确定STC在抑制KEAP1-NRF2相互作用方面的效果的。
BPS Bioscience，生物酶研究专家，可提供活性酶、蛋白酶活性/抑制剂筛选检测试剂盒、慢病毒等，产品涉及临床前药物开发过程的每个阶段，包括磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶（PARP）等热门指标的蛋白酶及酶活/抑制剂筛选检测试剂盒。
