【前情回顾】BPS Bioscience多聚ADP核糖聚合酶(PARP)酶活&抑制剂筛选检测试剂盒
当PARP1和PARP2结合到受损的DNA上时,它们会在自身的蛋白骨架上添加聚合酶酶链反应(poly(ADP-ribose),简称PAR)链,这被称为自动PAR化。然后,它们将PAR修饰添加到其他与DNA损伤应答(DNA-damage response,简称DDR)相关的蛋白上,以招募和激活这些蛋白。PAR化的PARP1和PARP2随后从DNA上解离,以便其他已经PAR化的伙伴能够启动修复过程。目前,一些经批准的药物可以通过与辅因子NAD+竞争结合到催化位点,从而降低PARP1和PARP2的活性。由于没有足够的NAD+供应,PARP无法进行PAR化并保持与受损的DNA结合,从而将其屏蔽起来,阻碍其他DDR蛋白的作用。这阻止了DNA的修复,并增加了细胞的毒性,增强了这些药物的效果。因此,这类药物的细胞毒性效应主要取决于它们在受损的DNA上固定PARP的效率。因此,在筛选这些药物时,应该包括量化PARP的固定能力,并且需要区分抑制剂对PARP1或PARP2的选择性的测定方法。
BPS Bioscience独特的PARPtrapTM检测试剂盒使用荧光偏振(fluorescence polarization,FP)的原理。在核糖基化之前,PARP与荧光DNA探针结合,形成大的复合物并发出偏振荧光。添加NAD+后,启动核糖基化,PAR化的PARP从DNA探针上解离,导致大部分荧光失去偏振性。相反,如果添加PARP抑制剂,就会导致PARP固定在DNA上,增加FP。所以,添加将PARP固定在荧光DNA探针上的抑制剂会导致相比无抑制剂条件下的荧光偏振增加,并与抑制剂的浓度和效力成比例。
BPS Bioscience独特的PARPtrapTM检测试剂盒,非常适用于药物研发和高通量筛选应用中,筛选增强PARP/DNA固定能力的小分子化合物。
货号 | 名称 | 规格 | 说明 |
80584 | PARPtrap™ Assay Kit for PARP1 | 96rxns. | 筛选增强PARP1/DNA固定能力的小分子化合物,并用于确定化合物的IC50值。 |
78296 | PARPtrap™ Assay Kit for PARP2 | 96rxns. | 筛选增强PARP2/DNA固定能力的小分子化合物,并用于确定化合物的IC50值。 |
78317 | PARPtrap™ Combo Assay Kit for PARP1 and PARP2 | 384rxns | 筛选增强PARP1/2在DNA上的固定能力的小分子化合物,并用于确定化合物的IC50值。 |
使用PARPtrap™试剂盒(货号#80584),在逐渐增加的Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305浓度下检测PARP1/DNA固定能力。“No compound”对应于“低FP对照”,“no NAD”对应于“高FP对照”
使用PARPtrap™试剂盒(货号#78296),在逐渐增加的Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305浓度下检测PARP1/DNA固定能力。“No compound”对应于“低FP对照”,“no NAD”对应于“高FP对照”
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BPS bioscience总部坐落于美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了选择之一。