PARPtrap试剂盒：评估药物将PARP固定在DNA上的能力

【前情回顾】BPS Bioscience多聚ADP核糖聚合酶（PARP）酶活&抑制剂筛选检测试剂盒

当PARP1和PARP2结合到受损的DNA上时，它们会在自身的蛋白骨架上添加聚合酶酶链反应（poly(ADP-ribose)，简称PAR）链，这被称为自动PAR化。然后，它们将PAR修饰添加到其他与DNA损伤应答（DNA-damage response，简称DDR）相关的蛋白上，以招募和激活这些蛋白。PAR化的PARP1和PARP2随后从DNA上解离，以便其他已经PAR化的伙伴能够启动修复过程。目前，一些经批准的药物可以通过与辅因子NAD+竞争结合到催化位点，从而降低PARP1和PARP2的活性。由于没有足够的NAD+供应，PARP无法进行PAR化并保持与受损的DNA结合，从而将其屏蔽起来，阻碍其他DDR蛋白的作用。这阻止了DNA的修复，并增加了细胞的毒性，增强了这些药物的效果。因此，这类药物的细胞毒性效应主要取决于它们在受损的DNA上固定PARP的效率。因此，在筛选这些药物时，应该包括量化PARP的固定能力，并且需要区分抑制剂对PARP1或PARP2的选择性的测定方法。

BPS Bioscience独特的PARPtrap^TM检测试剂盒使用荧光偏振（fluorescence polarization，FP）的原理。在核糖基化之前，PARP与荧光DNA探针结合，形成大的复合物并发出偏振荧光。添加NAD+后，启动核糖基化，PAR化的PARP从DNA探针上解离，导致大部分荧光失去偏振性。相反，如果添加PARP抑制剂，就会导致PARP固定在DNA上，增加FP。所以，添加将PARP固定在荧光DNA探针上的抑制剂会导致相比无抑制剂条件下的荧光偏振增加，并与抑制剂的浓度和效力成比例。

BPS Bioscience独特的PARPtrap^TM检测试剂盒，非常适用于药物研发和高通量筛选应用中，筛选增强PARP/DNA固定能力的小分子化合物。

使用PARPtrap™试剂盒（货号＃80584），在逐渐增加的Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305浓度下检测PARP1/DNA固定能力。“No compound”对应于“低FP对照”，“no NAD”对应于“高FP对照”

使用PARPtrap™试剂盒（货号＃78296），在逐渐增加的Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305浓度下检测PARP1/DNA固定能力。“No compound”对应于“低FP对照”，“no NAD”对应于“高FP对照”

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BPS bioscience总部坐落于美国圣地亚哥生命科学研究机构和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、组蛋白去甲基化酶、组蛋白甲基化转移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司为药物研发用重组酶类的提供了选择之一。