还在为繁琐的EMSA实验发愁?通用蛋白-DNA结合分析试剂盒简单可靠!

 

EMSA

EMSA,所谓何者?

 

凝胶迁移或电泳迁移率实验 (electrophoretic mobility shift assay, EMSA)是一种体外研究DNA结合蛋白(转录因子)和其相关的DNA结合序列(靶标基因的启动子序列)相互作用的技术,可用于定性和定量分析。

 

EMSA,知其所以然!

 

正如上方实验示意图所示, 蛋白质可以与核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。通过竞争性对照组,可以验证实验的特异性。

 

EMSA,难点与痛点

 

EMSA实验是很多实验新手的拦路虎,不仅实验步骤繁琐(凝胶电泳,转膜,紫外交联,信号检测),而且实验与对照组较多(通常为5组,标记探针标记探针+蛋白标记探针+蛋白+未标记探针(特异竞争寡核苷酸)标记探针+蛋白+未标记突变探针标记探针+蛋白+抗体),经过多次测试优化才能获得理想的实验结果,综合成本非常高。

 

突破EMSA,创新的新方法,Nature为您测试:

 

作为表观遗传学的专业解决方案供应商,艾美捷科技为您推荐,Epigentek品牌创新推出的通用蛋白-DNA结合分析试剂盒(比色法)

产品名称及描述 品牌 货号 产品说明
EpiQuik General Protein-DNA Binding Assay Kit
通用蛋白-DNA结合分析试剂盒(比色法)
Epigentek P-2004 详情

* 客户需自行准备如下材料:[1]生物素标记的特异性探针; [2]未标记的特异性探针;[3]目标蛋白的一抗与HRP-二抗

 

通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒原理:

 

通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒(比色),用于测量核提取物中转录因子与DNA结合活性。在实验中,含有靶向转录因子的DNA结合共有序列的生物素标记的双链寡核苷酸(寡核苷酸)与结合试验缓冲液中的核提取物一起温育。核提取物中活性形式的转录因子与其共有序列结合。然后将寡蛋白复合物捕获到测定微孔上。靶蛋白可以通过高亲和力抗体识别,并通过检测抗体 - 显色试剂反应系统进行比色测量。

 

产品特点与优势:

 

  1. 最快的程序:完整的检测可在3小时内完成。
  2. 可拆卸微孔板,使测定灵活:手动或高通量分析。
  3. 比色法分析,无放射性材料,更安全。
  4. 简单,可靠,一致的检测条件。

 

Nature文章发表结果:

 

《Klengel, Torsten, et al. "Allele-specific FKBP5 DNA demethylation mediates gene–childhood trauma interactions." Nature neuroscience 16.1 (2013): 33.》

rs1360780

rs1360780基因的A/G等位基因与TBP的结合能力分析,A等位基因的亲和力明显高于G.

 

更多发表文章,欢迎了解:

 

Hekmat-Scafe DS et. al. (November 2016). Using yeast to determine the functional consequences of mutations in the human p53 tumor suppressor gene: An introductory course-based undergraduate research experience in molecular and cell biology.Biochem Mol Biol Educ.

 

Jang JY et. al. (February 2016). Targeting adenine nucleotide translocase-2 (ANT2) to overcome resistance to epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor in non-small cell lung cancer. Mol Cancer Ther.

 

Koh J et. al. (October 2015). EML4-ALK enhances programmed cell death-ligand 1 expression in pulmonary adenocarcinoma via hypoxia-inducible factor (HIF)-1α and STAT3 OncoImmunology.

 

Gao Y The Univer et. al. (June 2014). Up-regulation of Hepatic VLDLR via PPARα Is Required for the Triglyceride-Lowering Effect of Fenofibrate. J Lipid Res.

 

* 通用蛋白质-DNA结合分析试剂盒说明书点击下载

 

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