T淋巴细胞特异性识别抗原后，可被双活化信号刺激后，通过信号转导启动有关基因转录，进而发生增殖，这是淋巴细胞的基本功能，反映了其对抗原的识别和发生免疫应答的能力。而流式细胞术，就是最常用的检测T淋巴细胞活化增殖的方法。
如何使用流式，简单快捷的检测活化的血样中T淋巴细胞的增殖反应呢？
作为专业的流式抗体与解决方案，艾美捷科技，为您推荐流式科研与诊断方案领导者EXBio的T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒（T-cell BlastoFlowEx Kit）
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T淋巴细胞增殖反应检测试剂盒 |
| T-cell BlastoFlowEx Kit | |
| 货号：ED7642 | |
| 规格：100 test | |
| 反应种属 | 人 |
| 应用类型 | 流式细胞术，FC |
| 试剂盒原理 | 该试剂盒使用抗CD3和抗Ki67抗体混合物检测增殖的淋巴细胞。 |
试剂盒组分：
| 组分 | 名称 | 形式 | 说明 |
| ED7642-1 | 固定与裂解液 | 10X浓缩液 | 稀释至1X后，每次实验加2ml |
| ED7642-2 | 破膜剂 | 10X浓缩液 | 稀释至1X后，每次实验加0.5ml |
| ED7642-3 | EDTA | 即用型 | 每次实验加25ul |
| ED7642-4 | CD3 PC/Ki-67 PE抗体预混液 | 即用型 | 每次实验加50ul |
实验流程：
- 从培养箱中取出试管，取下并丢弃管盖。每管中加入25 ul EDTA溶液，混合。
- 在37℃下孵育10分钟。
- 加入2ml的PBS，混合。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
- 轻轻摇动管子扰乱沉淀。加入2ml的稀释固定和裂解溶液，混合。室温下孵育10分钟。
- 400g离心细胞5分钟，移除上清液。
- 加入0.5ml稀释的破膜溶液，混合。室温下孵育10分钟。
- 加入2ml的PBS。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
- 加入50 ul的CD3/Ki-67 PE抗体预混液，混匀，室温下孵育至少30分钟。
- 加入2ml PBS。400g离心细胞5分钟，移除上清液。
- 用0.1-0.3ml的1％甲醛PBS溶液或者稀释的固定和裂解液（1份固定裂解液液+9份PBS的缓冲液）重悬细胞。在2-8℃下暗室条件下储存处理后的样品，直到分析。
结果展示：
1.用巨细胞病毒 -IE-1蛋白抗原肽体外刺激巨细胞病毒阳性供体全血
2.用巨细胞病毒 pp65抗原肽体外刺激巨细胞病毒阳性供体全血
3.全血在植物血凝素（PHA）管（货号：ED7634）中刺激，用T细胞BlastoFlowEx试剂盒处理并在流式细胞仪中进行分析。 CD3 + /单细胞的目标亚群显示为PE荧光的直方图。根据刺激阴性对照管（货号：ED7637）确定Ki-67阴性峰和Ki-67阳性峰之间的区分线。
【说明性】更加详细的操作指南与分析指南，请点击说明书下载
EXBIO是捷克一家著名的生物试剂公司，专注于流式细胞术配套试剂的开发。自1990年成立以来，EXBIO公司研发和制造的抗体分销全球。目前，EXBIO可提供超过4000种质优、价廉的研究和临床应用抗体，涵盖了血液学，免疫学，癌症，干细胞和细胞生物学等领域，如：CD分子、细胞粘附分子、细胞骨架、凋亡、细胞信号传导、肿瘤标志物、人血型、HLA、生殖等研究用抗体，涉及荧光染料如FITC、PE、PE-Cy5、PE-Cy7、APC、PerCP、PerCP-Cy5.5、Pacific Blue、Pacific Orange、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 647、Alexa Fluor 700、Biotin等多达13种，满足客户各类实验需求。
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