葡萄糖代谢是将葡萄糖转化为能量的过程，是大多数生物体中能量供应的主要来源，葡萄糖摄入细胞是葡萄糖代谢的首个限速步骤, 该过程受到严密的调控。目前的研究显示，葡萄糖摄取异常跟多种疾病相关，例如在许多癌症细胞中, 表现有葡萄糖摄取的上调, 从而表现出很高的有氧糖酵解比率；胰岛素耐受细胞在遇到胰岛素刺激时, 会出现葡萄糖摄入减弱。因此葡萄糖摄取的检测成为许多细胞代谢相关疾病中的一个重要的指标。
通过测量组织和细胞中葡萄糖类似物2-脱氧葡萄糖（2-DG）的摄取已被广泛认为是一种测定葡萄糖摄取的可靠方法，可用来评估萄糖的摄取量以及研究葡萄糖代谢的调节和胰岛素抵抗的机制。通常我们是通过使用同位素氚或C14标记的非代谢型的2-DG来检测2-DG的摄入量。然而，同位素标记探针的使用较为昂贵的，并且检测时需要繁琐的特殊处理程序。
今天给大家介绍一款艾美捷科技代理品牌AAT 的Screen Quest™比色法葡萄糖摄取分析试剂盒（货号：36503），这款试剂盒可采取非放射性分析分析的方法对组织或培养细胞进行葡萄糖摄取分析。在检测过程中，2-DG被葡萄糖转运蛋白吸收，并代谢成2-DG-6-磷酸（2-DG6P），不能代谢的2-DG6P在细胞中积累，积累的量与细胞的葡萄糖摄取成正比，累积的2-DG6P被酶促氧化并产生NADPH，然后通过显色NADPH探针特异性检测NADPH，通过酶标仪读取570nm-610nm的OD值信号即可反应2-DG的摄取情况。
检测结果展示：
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| 在分化的3T3-L1脂肪细胞和3T3-L1成纤维细胞中对2DG摄取进行检测。使用SpectraMax（Molecular Devices）微孔板读板器，在黑孔/透明底细胞培养Poly-D赖氨酸板子中，使用Screen Quest™比色法葡萄糖摄取检测试剂盒进行检测。 A：阴性对照，无胰岛素，无2-DG处理. B：在无胰岛素的情况下2DG摄取. C：在1mM胰岛素存在下2DG摄取. D：在1mM胰岛素和200 mM促视黄素存在下2DG摄取. E：在1mM胰岛素和5mM D-葡萄糖存在下2DG摄取. |
除了上面给大家介绍的比色法葡萄糖摄取试剂盒，我们还有2-NBDG葡萄糖摄取检测试剂盒（货号：23500）：
2-NBDG是一种荧光标记的葡萄糖示踪剂，2-NBDG通过与葡萄糖相同的葡萄糖转运蛋白（GLUT）转运到细胞中。一旦2-NBDG被细胞摄取，它就在C-6位置发生磷酸化，得到2-NBDG-6-磷酸，它很好地保留在细胞内。与其他葡萄糖示踪剂（例如2-DG或FDG）相比，2-NBDG可实现在单细胞水平上具有高时间和空间分辨率的2-NBDG的原位测量。（适用于荧光显微镜和流式细胞仪检测）
细胞中2-NBDG摄取的测定原理: 一旦2-NBDG被细胞吸收，它会在C-6位置进行磷酸化，生成2-NBDG-6-磷酸盐，该磷酸盐会很好地保留在细胞内, 荧光强度与细胞葡萄糖摄取活性成正比。
相关产品推荐：
| 产品名称（货号） | 参考结果 |
| 2-NBDG 葡萄糖摄取检测试剂盒（23500） |  使用Cell Meter™2-NBDG葡萄糖摄取测定试剂盒在CHO-K1细胞中摄取2-NBDG的荧光图像：将40,000个细胞/孔/ 100 µL的CHO-K1细胞在96孔黑色壁/透明底板中过夜接种。将细胞在37 ℃下用20 mM葡萄糖（B）或100 µ MPhloretin（C）处理1小时，然后与100 µM 2-NBDG染色液孵育20分钟。未处理的对照细胞在相同条件下染色。使用带有FITC滤光片的荧光显微镜测量荧光信号。 |
 使用Cell Meter™2-NBDG葡萄糖摄取测定试剂盒对CHO-K1细胞中2-NBDG摄取的流式细胞分析：将CHO-K1细胞在有或没有100 µM的荧光素的条件下于37ºC处理1小时，然后与100 µM的2-NBDG染色溶液一起孵育20分钟。为了准备粘附的CHO-K1细胞进行流式细胞分析，染色后使用EDTA分离细胞。使用ACEA NovoCyte流式细胞仪在FITC通道中测量荧光强度。 |
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| Screen Quest™ 荧光法葡萄糖吸收检测试剂盒（36500） |  |
葡萄糖摄取试剂盒引用文献赏析：
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| 36503引文：miR-143-3p functions as a tumor suppressor by targeting HK2 in neuroblastomas Authors: Cen, Yuanhua and Xu, Li and Huang, Saihu and Zhuang, Songqiang Journal: Int J Clin Exp Med (2019): 8450--8460 |
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| 36500引文：KLF10 Deficiency in CD4+ T Cells Triggers Obesity, Insulin Resistance, and Fatty Liver Authors: Wara, Akm Khyrul and Wang, Shijia and Wu, Chun and Fang, Fang and Haemmig, Stefan and Weber, Brittany N and Aydogan, Ceren O and Tesmenitsky, Yevgenia and Aliakbarian, Hassan and Hawse, John R and others Journal: Cell Reports (2020): 108550 |
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| 36500引文：miR-210 in Exosomes Derived from Macrophages under High Glucose Promotes Mouse Diabetic Obesity Pathogenesis by Suppressing NDUFA4 Expression Authors: Tian, Feng and Tang, Ping and Sun, Zhilian and Zhang, Ruifen and Zhu, Danhua and He, Junying and Liao, Jixing and Wan, Qinghua and Shen, Jie Journal: Journal of Diabetes Research (2020) |
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| 36500引文：Panax notoginseng saponins alleviate skeletal muscle insulin resistance by regulating the IRS 1-PI 3K-AKT signaling pathway and GLUT 4 expression Authors: Guo, Xuan and Sun, Wen and Luo, Guangbin and Wu, Lili and Xu, Guangyuan and Hou, Dan and Hou, Yi and Guo, Xiangyu and Mu, Xiaohong and Qin, Lingling and others Journal: FEBS open bio (2019) |
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