粪便收集保存和核酸提取的“一站式”方案

 

【前情回顾】:

 

【1】如何收集保存全血样品中游离cf-DNA和cf-RNA的呢,点击了解

【2】如何从血浆、血清样本中分离出游离RNA(cf-RNA),点击了解

【3】如何收集和保存尿液中DNA,RNA和蛋白质呢,点击了解

【4】如何提取尿液中的游离RNA(cf-RNA),点击了解

 

近日,美国食品药品监督管理局(FDA)发布通告称,因为接受了含有耐药细菌的粪便移植,两名患者发生严重感染,其中一名患者死亡。粪便微生物移植(fecal microbiota transplantation, FMT)治疗方法存在严重的潜在健康风险,甚至可能危及生命。目前,FDA 紧急叫停了一系列相关临床试验,除非研究者可以证明移植粪便样本不含多重耐药性生物。

 

粪便微生物移植治疗方法

 

粪便微生物移植,也被称为粪便移植,是一种通过灌肠、胃喉、或口服胶囊等途径,将健康捐赠者粪便菌群转移到患者体内,帮助患者恢复肠道菌落平衡,达到治疗目的的医学疗法。在一些案例中,粪便移植迅速发挥了作用,挽救了严重难治性腹泻患者的生命。然而,这一治疗手段还未经FDA批准,因此是实验性治疗。

 

如何收集、保存和提取纯化粪便中核酸呢?艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Norgen Biotek品牌的粪便样本处理的“一站式”产品服务。仅用于科学研究,不用于医学诊断和临床。

 

分类 产品名称及描述 货号 上样量 规格
收集保存 Stool Nucleic Acid Collection and Preservation Tubes 45660 2 g 50管
Stool Nucleic Acid Collection and Preservation System 63700 2 g 50次
Fecal DNA Collection & Preservation Mini Tubes 27650 ≤ 30 mg 12管
Fecal Swab Collection and Preservation System 45670 50次
核酸提取 Stool DNA Isolation Kit 27600 ≤ 200 mg 50次
Stool DNA Isolation Kit (Magnetic Bead System) 55700 ≤0.2 mL(0.2g) 50次
Stool Total RNA Purification Kit 49500 ≤ 200 mg 50次
Stool Nucleic Acid Isolation Kit 45600 ≤ 200 mg 50次

 

一.粪便收集与保存管特点和优势

 

粪便收集与保存管 粪便收集与保存管

 

Norgen的粪便收集和保存管设计用于快速保存新鲜粪便标本中的核酸。管中含有液体形式的粪便防腐剂。使用者只需将粪便收集到试管中(填充到标签中指示的线)并轻轻混合,直到粪便充分浸没在防腐剂下。粪便防腐剂可防止革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌和真菌的生长,并且还可灭活病毒。粪便防腐剂的组分允许样品中的DNA在室温下储存超过2年和RNA在室温下储存7天。为了延长防腐剂中粪便RNA的稳定性,建议在到达目的地时保存在-20°C或-70°C,直到RNA纯化。

 

  1. 防腐剂提供样品均匀性,消除样品变异性;
  2. 在环境温度下安全地保存并运输DNA和RNA;
  3. 无需低温运输/存储;
  4. 分离的核酸可用于任何应用,包括16s NGS;
  5. 在一定温度范围下可以保持稳定;
  6. 可定制各种配件,方便安全地收集;
  7. 消除异味并使样品安全且无感染性。

 

【粪便收集与保存管中DNA和RNA稳定性,厂家测试结果】:

 

从保存的粪便样本中分离的粪便DNA和RNA的完整性。从200µL保存在室温下的粪便中分离得到DNA和RNA,进行凝胶电泳分析。从常温保存27个月的粪便标本中分离出高完整性的粪便DNA,从常温保存7天的粪便标本中分离出高完整性的RNA。

 

 粪便收集与保存管中DNA和RNA稳定性

 

二.粪便DNA提取试剂盒特点和优势

 

粪便DNA提取试剂盒

 

  1. 同时分离宿主DNA和微生物DNA;
  2. 消除包括腐殖酸在内的PCR抑制剂;
  3. 用于敏感下游应用的高质量DNA,包括PCR,qPCR,测序和微阵列。

 

【粪便DNA提取试剂盒—各品牌横向对比】:

 

(左图)NanoDrop测量的粪便DNA质量和浓度。使用Norgen粪便DNA提取试剂盒从新鲜或保存的粪便样品中获得高DNA浓度和质量。图A:新鲜粪便样品,图B:使用粪便保存收集管(货号45660)保存的粪便样本。

 

(右图)使用Norgen粪便DNA提取试剂盒和竞争对手试剂盒检测从200 mg新鲜粪便样品中分离的粪便DNA中的5S rRNA。 

 

粪便DNA提取试剂盒—各品牌横向对比 粪便DNA提取试剂盒—各品牌横向对比

 

粪便RNA提取试剂盒特点和优势

 

粪便RNA提取试剂盒特点和优势

 

  1. 同时分离宿主RNA和微生物RNA;
  2. 从大RNA到小RNA和microRNA分离RNA的完整多样性;
  3. 消除包括腐殖酸在内的PCR抑制剂;
  4. 用于敏感下游应用的高质量RNA。

 

【粪便RNA提取试剂盒—各品牌横向对比】:

 

纯化的粪便RNA的产量和质量。使用Norgen粪便RNA提取试剂盒和领先的竞争对手试剂盒从200mg人粪便中分离总RNA。然后基于产率进行比较,Norgen试剂盒分离出更高量的RNA,平均产量为14.58μg。

 

粪便RNA提取试剂盒—各品牌横向对比

 

使用16S引物检测细菌性粪便RNA。使用Norgen粪便RNA提取试剂盒和领先的竞争对手试剂盒从200mg人粪便中分离总RNA。使用具有16S反向引物的Invitrogen的Superscript III系统,在20μL逆转录反应中使用5微升纯化的RNA。然后将产生的cDNA用于qPCR反应。Norgen的试剂盒超过了主要竞争对手试剂盒平均1.5 Ct值。这表明Norgen从粪便中分离出更高质量和RNA的产量,可用于一系列下游应用。

 

Norgen从粪便中分离出更高质量和RNA的产量

 

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Norgen Biotek成立于1998年,公司总部位于加拿大,是一家著名全球化生物技术公司,生产基于专利技术的核酸和蛋白质纯化及富集产品用于研究和诊断。Norgen Biotek 在2003年获得加拿大国家研究委员会颁发的科技创新奖,是一家致力于样品制备并获得ISO 9001(产品质量)、ISO 13485(产品可用于商业化的医疗设备,包括用于体外诊断领域)和ISO 15189(可用于临床检测机分子诊断领域的研发能力)认证的生物科技公司。目前该公司的产品多达700余种,提供一流的样品制备试剂盒,应用于基因组和蛋白组等不同的领域。

 

艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。

 

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