Nature Methods:如何对整个生物体的分子解剖取样

2023年12月18日,来自德国马克斯·普朗克生物化学研究所Jürgen M. Plitzko等研究人员合作在《自然—方法学》发表了标题为“Serial Lift-Out: sampling the molecular anatomy of whole organisms.”的研究成果,研究人员开发出新方法可对整个生物体的分子解剖取样

Serial Lift-Out

Serial Lift-Out 示意图

研究人员介绍一种增强型移出技术——Serial Lift-Out,该技术通过从单次转移中制备多个切片来提高处理量和可获取的背景信息。研究人员将Serial Lift-Out技术应用于草履虫L1幼虫,得到了一个采样于该虫前后轴的低温电子断层扫描cryo-ET)数据集,并解析了其7Å的核糖体结构和13Å的11-原丝微管亚区,从而说明了Serial Lift-Out技术是如何实现多细胞分子解剖学研究的。

 

研究人员表示,通过对冷冻水合细胞进行低温聚焦离子束铣削以及随后的cryo-ET,可以直接阐明细胞内大分子复合物的结构。然而,该技术在多细胞生物体和组织中的应用仍受到样品制备的限制。虽然高压冷冻可以使较厚的样本玻璃化,但由于减薄时间增加和需要提取程序,延长了后续制备时间。此外,薄化还会去除样本的大部分,从而将可成像体积限制在最终薄片的厚度范围内,通常小于300纳米。

 

文章来源:

Schitz, Oda Helene, Kaiser et al, Serial Lift-Out: sampling the molecular anatomy of whole organisms.DOI: 10.1038/s41592-023-02113-5,Nature Methods:最新IF:47.99

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