Solis BioDyne带你玩转长片段PCR

 

多聚酶链反应(polymerase chain reaction, PCR)是1983年由Mullis首创的一种通过体外酶促扩增反应快速获取大量特定DNA序列的方法,目前已在分子生物学、分子遗传学、医学等领域得到广泛应用。但是传统的PCR通常只能扩增3kb以内的短片段,对于3kb以上的长片段很难进行有效扩增。

 

长片段PCR受限制的原因有:①常用的Taq酶无3’→5’核酸外切酶活性,无校对功能,易产生错配碱基,导致链合成提前终止;②Taq酶在PCR过程中活力降低;③非特异性扩增干扰长片段的延伸;④PCR过程本身损伤了模板(脱嘌呤或断裂),导致长片段无法合成。

 

长片段PCR

 

Solis BioDyne多年专注PCR相关试剂的研发与生产,可提供相对长片段PCR的两种DNA聚合酶(FIREPol® Blend Master Mix)进行反应:一种是常规PCR反应中应用的耐热FIREPol® DNA聚合酶,它具有很强的延伸能力,依赖此酶进行链的延伸;另一种是具有3’→5’核酸外切酶活性的DNA聚合酶,它具有较好的校读功能,可以将错配的碱基切割下来重新利用第一种酶进行链的延伸。两种酶各有优缺点,充分利用第一种酶的延伸能力和第二种酶的校读功能,使两种酶在反应中相辅相成,完成长片段DNA的扩增。

 

长片段DNA扩增

 

性能:

► 保真度高:保真度是普通Taq酶的5倍;

► 准确性高:将耐热的DNA聚合酶、增强的延伸功能、校正功能结合起来;

► 片段更长:目前已验证可稳定合成λDNA 8kd, 人类基因组DNA 5kd;

► 扩增产物:适用于平端克隆;

► 性能增强:使用优化的组分,产量、灵敏度、特异性显著提高;

► 稳定性好:室温可放置1个月,扩增效率不受影响。

 

名称 货号 特征 备注
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00115 7.5 mM MgCl2 含染料,在PCR结束后可以直接电泳,无需加入上样缓冲液。
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00120 10 mM MgCl2
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00125 12.5 mM MgCl2
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix Ready to Load 04-25-00130 15 mM MgCl2
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix 04-27-00115 7.5 mM MgCl2 不含染料,无色
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix 04-27-00120 10 mM MgCl2
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix 04-27-00125 12.5 mM MgCl2
5x HOT FIREPol® Blend Master Mix 04-27-00130 15 mM MgCl2

 

Solis BioDyne来源于欧盟-爱沙尼亚共和国,自1995年以来,Solis BioDyne一直致力于开发和生产高品质的生命科学试剂,现已成为当今欧洲领先的试剂供应商之一。高标准的生产标准和服务使Solis BioDyne成为全球值得信赖的首选PCR供应商。我们的DNA聚合酶,PCR Master Mixes,qPCR Mixes和其它试剂被全球110多个国家的研究者所使用,包括顶级研究机构和生物技术公司。

 

艾美捷科技与国内外优秀的生物试剂供应商保持着密切的合作关系,目前已成为众多国际知名品牌的中国总代理或一级代理,主要包括:Abbkine、AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、PhytoAB、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一时间为用户提供最前沿的专业资讯、完备的产品及物流服务。

 

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