【荧光素大全】—荧光素及其衍生物产品汇总

 

荧光素衍生物具有高吸收率,出色的荧光量子产率和良好的水溶性,是流式细胞仪和免疫荧光法等生物检测中最常用的荧光标记之一。最广泛使用的荧光素包括用于标记蛋白质(特别是抗体)的异硫氰酸荧光素(FITC)和用于标记肽和寡核苷酸的羧基荧光素(5-FAM5(6)-FAM)。 我们提供各类的荧光素染料,底物和结合物,以及一系列具有改良特性的卓越iFluor™荧光标记染料,这些染料针对细胞标记和检测进行了优化。
 

光谱性质

 

表1. 5-异硫氰酸荧光素(5-FITC)的光谱性质

指标 数值
激光线: 488 nm激光
筛选器集: FITC
Ex / Em(nm): 494/525 nm
消光系数(ε): 75,000 cm-1 M -1
量子产率(Φ): 0.79

5-异硫氰酸荧光素的激发和发射光谱

图1. 5-异硫氰酸荧光素(5-FITC)* CAS 3326-32-7 *(Cat:121)的激发和发射光谱。

 

iFluor™488-FITCAlexaFluor®488的卓越替代品

 

尽管基于荧光素的染料和缀合物有亮绿色荧光,但仍可能会限制其在某些应用中的使用。具有相同光谱特性的iFluor™488染料可在较宽的摩尔范围内产生更亮,更光稳定的结合物,且对pH值不敏感。iFluor™488染料分子能以高摩尔比与生物分子结合,同时产生最小的自发淬灭(图2和图3)。

HeLa细胞之间的荧光强度比较

图2. 用GAM IgG-FITC和GAM IgG-iFluor™488标记的HeLa细胞之间的荧光强度比较。

 iFluor™488山羊抗小鼠IgG和FITC山羊抗小鼠IgG的光漂白速率的比较

图3. iFluor™488山羊抗小鼠IgG和FITC山羊抗小鼠IgG的光漂白速率的比较。HeLa细胞的微管蛋白用iFluor™488 GAM-IgG(顶部)或FITC GAM-IgG(底部系列)标记。在Keyence X710荧光显微镜上以60秒的间隔拍摄图像。TFI代表由ImageJ软件计算的总荧光强度。

 

表2. 用于标记生物分子的可用iFluor™488反应染料

产品 化学
反应性
反应
部分
Ex
(nm)
Em
(nm)
ε1 规格 货号
iFluor™488琥珀酰亚胺酯 琥珀酰亚胺酯 491 516 75000 1mg 1023
iFluor™488马来酰亚胺 硫醇 马来酰亚胺 491 516 75000 1mg 1062
iFluor™488炔烃 叠氮化物 炔烃 491 516 75000 1mg 999
iFluor™488胺 醛,羧酸,酮 491 516 75000 1mg 1072
iFluor™488叠氮化物 炔烃 叠氮化物 491 516 75000 1mg 1000
iFluor™488酰肼 醛,羧酸,酮 酰肼 491 516 75000 1mg 1082

注意ε= 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数(单位= cm -1 M -1

 

1. 荧光素相关产品

 

我们提供广泛的荧光素产品选择,包括反应性荧光素和荧光素衍生物,用于标记抗体,核酸和其他生物分子,结合物,指示剂以及用于检测细胞,组织匀浆和溶液中酶活性的底物。

 

荧光素标准品:

产品名称 货号
荧光素* CAS 2321-07-5 * 1
荧光素,二钠盐* CAS 518-47-8 * 2

FRET组件:

产品名称 货号
FMOC-Lys(5-FITC)-OH(普通供体染料) 5070
FMOC-Lys(TQ2)-OH(荧光素淬灭染料) 5256
FMOC-Asp(TQ2)-OH(荧光素淬灭染料) 5206
FMOC-Glu(TQ2)-OH(荧光素淬灭染料) 5236

 

荧光素前体

 

DNA测序构建块

校准品

 

2. 反应荧光素染料

 

反应性荧光素和荧光素衍生物广泛用于共价标记生物分子,例如抗体,碳水化合物,核酸,蛋白质,肽和寡核苷酸。荧光素缀合物可产生强烈的明亮和稳定的绿色荧光,当与蓝色,黄色或红色荧光探针结合使用时,通常用作检测酶活性或在彩色荧光研究中提供对比的底物。荧光素和荧光素衍生物很容易在各种染料标记化学中用到,主要包括:

 

  • 琥珀酰亚胺酯/ NHS酯-用于标记抗体,蛋白质,肽,胺修饰的寡核苷酸和其他生物分子上的游离胺(-NH?)
  • 马来酰亚胺-用于标记抗体,蛋白质和肽上的巯基
  • 叠氮化物-通过点击化学方法(click chemistry)标记乙烯基
  • 炔烃-通过点击化学方法标记叠氮化物
  • 酰肼-用于标记醛基和酮基
  • 羧酸-用碳二亚胺预活化后标记胺,或用于醇的酯化
  • 胺-用于标记各种亲电子化合物,例如活化的酯
  • 四嗪-用于通过反电子需求Diels-Alder反应标记反式环辛烯(TCO)化合物
  • 亚磷酰胺-标记寡核苷酸

 

表3. 反应性荧光素和荧光素衍生物可用于标记生物分子

产品 化学
反应性
反应
部分
Ex
(nm)
Em
(nm)
ε1 规格 货号
5(6)-FAM,SE * CAS 117548-22-8 * 琥珀酰亚胺酯 493 517 83000 25mg 110
5(6)-FAM * CAS 72088-94-9 * 碳二亚胺预活化后的胺 羧酸 493 517 83000 1g 100
5(6)-FAM乙二胺 醛,羧酸,酮 乙二胺 493 517 83000 100mg 123
SE,5-FAM 琥珀酰亚胺酯 493 517 83000 10mg 113
5-FAM-X,SE * CAS 148356-00-7 * 琥珀酰亚胺酯 493 517 83000 5mg 113
5-FAM叠氮化物 炔烃 叠氮化物 493 517 83000 10mg 131
5-FAM炔烃 叠氮化物 炔烃 493 517 83000 10mg 132
5-FAM * CAS 76823-03-5 * 碳二亚胺预活化后的胺 羧酸 493 517 83000 100mg 103
5-FAM乙二胺 醛,羧酸,酮 乙二胺 493 517 83000 100mg 124
6-FAM,SE * CAS 92557-81-8 * 琥珀酰亚胺酯 493 517 83000 10mg 116

 

3. 荧光素标记的酶底物

 

荧光素和荧光素衍生物经常用于制备用于检测细胞和溶液中酶活性的荧光底物。当被目的酶水解时,荧光素修饰的底物显示出与酶活性成线性比例的荧光强度增加。AAT Bioquest提供了多种荧光素修饰的底物,用于检测胱天蛋白酶,蛋白酶,肽酶,磷酸酶等的活性。

 

表4. 可用荧光素标记的底物

产品 生物功能 Ex(nm) Em(nm) 规格 货号
FDG [荧光素二-β-D-吡喃半乳糖苷] β-半乳糖苷酶底物 498 517 1g 14001
FDP [二氟荧光素,四铵盐] * CAS 217305-49-2 * 磷酸酶底物 498 517 5mg 11600
FCB [Fluoresceindi-β-D-cellobioside] 纤维素酶(例如β-葡萄糖苷酶,内切葡聚糖酶和外切葡聚糖酶)底物 498 517 1mg 14025
酪蛋白,FITC缀合 通用蛋白酶底物 498 517 5mg 13440
FAM-VAD-FMK 多聚半胱氨酸蛋白酶抑制剂(胱天蛋白酶1、2、3、6、8、9或10) 493 517 25 tests 13470
FITC-C6-DEVD-FMK Caspase 3底物 491 516 100ug 13408
FITC-C6-D(OMe)E(OMe)VD(OMe)-FMK Caspase 3底物 491 516 100ug 13417
FITC-C6-LEHD-FMK Caspase 9底物 491 516 100ug 13409
FDGlcU [荧光素二-β-D-葡糖醛酸苷] β-葡萄糖醛酸酶底物 498 517 1mg 14002
葡萄糖-UDP-荧光素结合物 葡萄糖基转移酶底物 498 517 100ug 11705

 

4. 荧光素标记的缀合物

 

荧光素标记的缀合物因其亮绿色荧光和出色的光稳定性而在生物成像和生物标记中具有广泛的应用。荧光素衍生物可以标记抗体,链霉亲和素,鬼笔环肽, Annexin v,右旋糖酐和其他生物分子,以研究细胞凋亡,标记细胞器或通过放大微弱信号来提高测定灵敏度。

 

表5.可用荧光素标记的荧光缀合物。

产品 生物功能 Ex(nm) Em(nm) 规格 货号
生物素-4-荧光素* CAS 1032732-74-3 * 以高亲和力与链霉亲和素四聚体结合 492 518 5mg 3006
Annexin V,FITC标记 检测细胞表面的磷脂酰丝氨酸 491 516 100 tests 20030
鬼笔环肽-荧光素结合物 标记肌动蛋白丝(F-肌动蛋白) 498 517 300 tests 23101
FITC-链霉亲和素偶联物 间接结合生物素化的一抗,放大信号 491 516 1mg 16910
荧光素生物素 以高亲和力与链霉亲和素四聚体结合 498 517 5mg 3017
FITC山羊抗小鼠IgG(H + L) 间接检测小鼠一抗 491 516 1mg 16852
FITC山羊抗小鼠IgG(H + L)*交叉吸附* 间接检测小鼠一抗 491 516 1mg 16860
FITC山羊抗兔IgG(H + L) 间接检测兔一抗 491 516 1mg 16868
FITC山羊抗兔IgG(H + L)*交叉吸附* 间接检测兔一抗 491 516 1mg 16876
FITC-葡聚糖结合物(平均分子量=〜20K) 心血管,微循环,灌注,细胞膜通量示踪剂 491 516 25mg 21700

 

5. 荧光素指示剂

 

荧光素指示剂是生物化学和细胞研究中的重要工具。它们已用于荧光成像的所有主要类型,包括流式细胞仪,荧光显微镜和基于荧光板的分析。AAT Bioquest提供了多种荧光素指示剂,可用于测量细胞的pH值,钙浓度,细胞增殖,细胞活力等。

 

表6.可用的荧光素指示剂

产品 生物功能 Ex (nm) Em(nm) 规格 货号
FDA [氟乙酸甘油酯] * CAS 596-09-8 * 细胞活力指标 498 517 1g 22020
荧光素二辛酸酯[荧光素二辛酸酯] 细胞活力指标 498 517 100mg 22019
荧光素二辛酸酯*水溶性* 细胞活力指标 498 517 5mg 22018
CFSE [5-(和6)-羧基荧光素二乙酸酯,琥珀酰亚胺酯] * CAS 150347-59-4 * 细胞增殖指标,细胞活力指标 498 517 25mg 22022
CDCFDA,SE [5-(和-6)-羧基-2',7'-二氯荧光素二乙酸酯,琥珀酰亚胺酯] *混合异构体* 细胞增殖指标,细胞活力指标 498 517 25mg 22026
ReadiUse™CFSE [5-(和6)-羧基荧光素二乙酸酯,琥珀酰亚胺酯] * CAS 150347-59-4 * 细胞增殖指标,细胞活力指标 498 517 5 x 500mg 22028
CDCFDA [5-(and-6)-Carboxy-2',7'-dichlorofluorescein diacetate] *混合异构体* 细胞活力指标 498 517 100mg 22025
CFDA [5-(和6)-羧基荧光素二乙酸酯] *混合异构体* 细胞活力指标 498 517 100mg 22021
二乙酸二氢荧光素[二乙酸氟树脂] * CAS 35340-49-9 * 细胞活力指标,氧化还原指标 498 517 100mg 15203
BCECF,AM 细胞渗透性pH指示剂 504 527 1mg 21202

 

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