蛋白质印迹法(Western Blot)是目前蛋白质分析的一种常规方法。每一个研究生进行蛋白质分析、检测的首选。而我们在做WB的实验时,结果中的条带会出现各种稀奇古怪的现象。比如WB条带常见问题之一是带型异常:
带型异常 | 条带拖尾,样品溶解不好 |
条带呈微笑状,凝胶不均匀冷却,中间冷却不好 | |
纵向条纹,样品中含有不溶解性颗粒 | |
条带偏斜,电极不平衡或者加样位置偏斜暗片白条带,-抗或二抗加入过多,适当稀释 | |
条带两边扩散,样本中盐离子浓度过高 |
当出现弯曲的条带时应如何使用ImageJ进行调整呢?
拉直WB偏斜条带
下图是一个典型的带型偏斜的条带:
步骤:
- Image J软件打开上述图片,选择下图红框所示Segmented line沿着倾斜条带画间断线段:
- 鼠标双击Segmented line选项,设置线段的宽度至包含所有条带:
- 点击菜单栏Edit,Selection,Straighten,倾斜的WB条带即可拉直:
该功能的其他示例,如将弯曲的尼罗河拉直:
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