WB干货|返校后你必须要知道的WB样本前处理产品组合方案

 

在五一黄金旅游季后,天气回暖。在全国军民同心的共同努力下,疫情日渐好转,而在家隔离多日的小伙伴们对科研事业孜孜以求的精神“断崖式”增长。在复工复学的大潮中,小伙伴们怀着激动的心情回到了心心念念的实验室,开启自己热爱的实验生涯。温故而知新,Abbkine专家为大家精心打造出一套用于WB实验样本前处理的实验方案。有了成熟的蛋白样本前处理方法,WB实验就成功了一大半。说到这里,大家可能对我们的实验方案已经迫不及待了,接下来我们实验方案即将为您呈现:

 

WB实验方案

 

  1. 蛋白提取

根据研究对象的不同,我们需要对细胞不同区域的相关蛋白进行深入研究,此时ExKine系列胞浆/胞膜/胞核等区域蛋白提取的试剂盒在Abbkine科学家精益求精的科研态度下应运而生。

 

货号 名称 功能
KTP3001 ExKine™ Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 细胞核&胞浆蛋白提取
KTP3002 ExKine™ Nuclear Protein Extraction Kit 细胞核蛋白提取
KTP3003 ExKine™ Cytoplasmic Protein Extraction Kit 胞浆蛋白提取
KTP3004 ExKine™ Total Membrane Protein Extraction Kit 总膜蛋白提取(含细胞器膜核膜)
KTP3005 ExKine™ Membrane and Cytoplasmic Protein Extraction kit 胞浆蛋白&膜蛋白提取(不含核膜)
KTP3006 ExKine™ Total Protein Extraction Kit 总蛋白提取

 

除了对细胞不同区域显微结构进行研究,我们的研究水平也会更深入地进入到细胞的亚显微结构。要研究亚显微结构,首先我们的落脚点就在不同细胞器中的蛋白研究,科学家们将会把细胞质内结构相对独立的细胞器进行提取,再用温和的细胞裂解液(如:RIPA细胞裂解液)对提取的细胞器进行裂解,便可提取到纯净的不同细胞器蛋白。再对该类蛋白进行定性定量的深入研究。

 

货号 名称
KTP4001 ExKine™ Nuclei Extraction Kit
KTP4002 ExKine™ Nuclei Extraction Kit (High Purity)
KTP4003 ExKine™ Mitochondrion Extraction Kit (Cultured Cells)
KTP4004 ExKine™ Mitochondrion Extraction Kit (Tissue)

 

  1. 蛋白纯化

随着基因重组技术的发展,越来越多的融合蛋白成为人们研究靶蛋白的一个重要手段。而其中一个重要运用就是标签蛋白。运用标签蛋白的抗原特异性强且对靶蛋白的结构功能几乎不存在影响这个特征,人们可以用标签蛋白纯化填料将带有相应标签的重组蛋白进行识别并分离出来。由此,我们设计出来了Purkine系列蛋白纯化工具。

 

产品种类 货号
His 标签蛋白纯化工具 BMR20000
GST 标签蛋白纯化工具 BMR20100
MBP 标签蛋白纯化工具 BMR20206
Flag 标签蛋白纯化工具 BMR21504
Biotin 标签蛋白纯化工具 BMR20306
Protein A抗体纯化工具 BMR21604
Protein G抗体纯化工具 BMR20600
Protein A/G抗体纯化工具 BMR20704
Protein L抗体纯化工具 BMR20800

 

温馨提示:如果是不带标签的普通蛋白,则不需要以上操作,为避免蛋白降解,在细胞/组织裂解之后,直接进入第三步。

 

  1. 蛋白定量

蛋白样品在进行WB上样前,需进行蛋白浓度的定量,以确保SDS-PAGE每个胶孔内的蛋白总量保持一致。这样才能在后期分析条带灰度值的时候,蛋白含量的相对大小才具有参考依据。因此,蛋白定量这个操作在WB实验过程中起着举足轻重的作用。因此在选择蛋白定量试剂盒的时候,需要选择质量稳定,条件合适的试剂盒进行浓度测定。Abbkine经过多年的倾力打造,设计出了两款性能良好、应用范围广的蛋白定量试剂盒。

 

品名 货号
蛋白质定量试剂盒(BCA法) KTD3001
蛋白质定量试剂盒(Bradford法) KTD3002

 

由于这两种试剂盒的功能性质有所区别,因此各位研友在蛋白定量试剂盒选取过程中须谨慎,有想对蛋白定量技术有更深入了解的研友们请与Abbkine的技术支持(support@abbkine.com)联系。

 

Abbkine的技术专家为了给广大读者提供学习生物知识的平台,经过不懈努力,将多种高端生物实验的干货整理出来,后期陆续在微信公众号中刊登,请广大热爱科学的读者持续关注Abbkine公众号。

 

Abbkine专注于蛋白学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。我们为您提供蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业! 关于Abbkine我们的定位:服务于细胞和蛋白研究全球用户,以应用流程和产品组合的方式为用户提供经济型和技术型的产品解决方案。我们的使命:激发我们内在的创造力,提供有竞争力的生物医学产品和服务,持续为客户创造最大价值。我们的愿景:成为受人尊重、世界一流的生物医学产品及服务供应商。

 

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