MitoCheck Complex kit 不仅仅是呼吸链复合体抑制物筛选那么简单!

摘要

MitoCheck Complex kit 不仅仅是呼吸链复合体抑制物筛选,开启你忽视的MitoCheck Complex Activity Assay kit隐藏属性

从前有座山(喻家山,珞珈山还是龟山?管他呢),山外有个那啥,嗯,屋子,屋子里有个小编。有一天,这小编不经意瞄到Cayman有一套很NB的MitoCheck Complex Activity Assay kit,很好很强大有木有。于是,小编很嗨森的把这套产品从原理到内容详细介绍了一遍,在造福广大科研工作者之后,深藏功与名了。

 

于是,新来的小小编在众多热情科研工作者的盘问下,发现该产品并非只有抑制物筛选功能,在于厂家沟通之后,确定MitoCheck Complex Activity Assay kit除了高通量筛选呼吸链复合体抑制剂外,还有一个被大家忽视却又很有兴趣的隐藏属性——线粒体呼吸链复合体活性检测。那么,这两个功能在使用时,究竟有什么差别呢?且听小小编一一道来。

 

产品名称 货号 详情
MitoCheck Complex I Activity Assay Kit 700930-96 详情
MitoCheck Complex II Activity Assay Kit 700940-96 详情
MitoCheck Complex II/III Activity Assay Kit 700950-96 详情
MitoCheck Complex IV Activity Assay Kit 700990-96 详情
MitoCheck Complex V Activity Assay Kit 701000-96 详情

 

从试剂盒的组成来看,五个试剂盒都提供了牛心脏线粒体组分,不消说,这个组分是用来筛选抑制剂的。这也是试剂盒的主打买点,不需要客户准备线粒体就能进行抑制剂筛选。但是,唯一需要准备的是抑制剂阳性对照,譬如说,鱼藤酮、寡霉素或者氰化钾之流。

 

activity-item

 

很多人过来问小小编,我要测活性啊,氰化钾太毒啊,买不到啊,咋整啊。小小编研究了一下,发现,五种复合体的抑制剂都是不一样的,所以,尽量想办法吧,如果你要做抑制剂筛选的话。诶,被你发现了对不对,没错,假如你是要做处理过后的组织或者细胞的线粒体呼吸链复合体活性检测的话,放心,抑制剂阳性对照品这种让人头痛的东西就不需要了,没错,就是这么傲娇,不要了。

 

产品名称 货号 详情
MitoCheck Mitochondrial (Tissue) Isolation Kit 701010-1 详情
Mitochondria/Cytosol Fractionation Kit K256-100 详情

 

很明显 ,如果是做活性检测,那相应的实验步骤也要变动。譬如说,你要自己提线粒体了吧。那么什么样的样本才是合乎要求的呢,敲黑板啦,记住合格的样本是提出的线粒体蛋白浓度不低于5 mg/mL,根据现有的童鞋反馈的信息,一般106细胞手提都能够达到需求。当然你或者会觉得手提麻烦,没关系,我们有专门的试剂盒给你准备的哟。当然,如果你想手提,但是不知道方法,没关系,后续我们会为诸位整理一个线粒体手提的protocol,到时候记得收藏呀。

 

reaction-catalyzed

然后,在实验检测阶段,把kit中的protocol翻出来,把其中的牛线粒体组分自觉用您自己的线粒体替代就ok啦。当然质控组还是需要用试剂盒提供的线粒体的,记得,保证反应体系不变哟。所有加抑制剂的那一步,请自觉忽略。其它的就没什么啦,按着流程走就好。不要说对照怎么做,您没处理的实验组不就是对照么。

reaction-scheme

最后,不要以为,可以用一个kit检测5个复合体,原理不一样的,用的底物不一样啊,关键时刻,不能太抠才是。

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线粒体呼吸链复合体检测试剂盒

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