羟自由基清除能力测定的意义

 

啥是羟自由基

 

羟自由基(.OH)是一种重要的活性氧,从分子式上看是由氢氧根(OH-)失去一个电子形成。羟自由基具有极强的得电子能力也就是氧化能力,氧化电位2.8eV。是自然界中仅次于氟的氧化剂。

 

结构式:

羟自由基

 

羟自由基在人体中是人体在新陈代谢过程中产生的对生物体毒性最强、危害最大的一种自由基。它可以使组织中的糖类、氨基酸、蛋白质、核酸等物质发生氧化,遭受氧化性损伤和破坏,导致细胞坏死或突变;另外衰老、肿瘤、水污染等均与羟自由基有关。继而又发现许多由它所致有害效应当加入羟自由基的清除剂后会明显降低,研究羟自由基的清除剂(如某些有机硒化物等)对研究某些病变原因、衰老机理的揭示具有重大意义。

 

羟自由基产生的方式及参与的体内反应

 

在生化研究中,发现羟自由基产生方法大致可分四类:

 

1.芬顿(Fenton)反应型,即H2O2-Fe2+体系;

2.在催化剂作用下,H2O2发生非芬顿型反应;

3.在一定条件下,一些含巯基的有机物质发生自身氧化还原反应;

4.H2O2在紫外线照射下。

 

羟自由基在体内的形成主要是由过氧化物负离子和过氧化氢反应生成:

 

·O2-+ H2O2------>·OH + ·OH +O2

 

羟自由基(·OH)在体内参与三种反应:

 

1.使金属离子氧化形成高氧化态

2.从C-H键中吸收一个H原子,使形成水和有机化物基团(organic radical)

3.加到双键上形成二级基团

 

羟自由基清除能力测定的方法

 

目前有关羟自由基的分析测试方法主要有高效液相色谱法、化学发光法、荧光分析法、分光光度法等。其中测定羟自由基清除能力最常用的是通过分光光度法测定样本抑制显色物邻二氮菲的吸光度的下降,反映样本清除羟自由基的能力。其原理为:

 

H2O2/ Fe2+ 通过 Fenton 反应产生羟自由基,将邻二氮菲- Fe2+水溶液中 Fe2+氧化为 Fe3+ ,导致 536nm 吸光度下降,样品对 536nm 吸光度下降速率的抑制程度,反映了样品清除羟自由基的能力。

 

 

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