食品安全检测,Elisa试剂盒怎么选?

 

前情回顾:食品真菌毒素检测的那些事

 

Elisa生物检测是一种敏感度高,同时特异性强,重复性好的实验检测方法,由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

 

目前市面上的Elisa试剂盒检测原理主要有以下四种:直接法,间接法,夹心法,竞争法。

 

Elisa试剂盒

 

四种Elisa检测方法由于其检测原理各有优劣:

 

优点 缺点
直接法 1.操作简便
2.消除了二抗交叉反应
1.一抗由于添加标签免疫活性降低
2.标记一抗耗时且昂贵
3.没有产生信号放大
间接法 1. 一抗的最大免疫反应性得以保留
2. 高灵敏度,信号放大
1. 二级抗体可能发生交叉反应,产生非特异性信号
2. 需要额外的孵育步骤
夹心法 1.特异性,灵敏度高
2.适合复杂的样本
1.检测时间,反应时间增加
2.步骤繁琐
竞争法 1. 通过观察预期信号输出中的干扰来测量样本中抗原(或抗体)的浓度。
2. 最常用于分析物较小,不能同时跟两种不同的抗体结合。
1.计算不太直观
2.总体敏感性和特异性较低。

 

通常我们在购买我们所需要的食品安全检测相关Elisa试剂盒时主要会从以下几个方面进行选择:

食品安全检测相关Elisa试剂盒选择原则:

 

指标 选项
样本类型 人,小鼠,大鼠
检测指标的类别 •多表位的大蛋白:夹心ELISA
•小分子:竞争ELISA
检测需求 定性或定量
灵敏度 低浓度的物质需选择高灵敏度检测方式
样本体积 珍贵的样本用少量的体积
回收率和线性 •灵敏度
•动态范围
•标准曲线
检测系统 比色法,荧光法,发光法
其他优势 协议简单,操作方便,实验时间短

 

我们购买的食品安全检测相关Elisa试剂盒质量到底怎样?检测结果的可信度高不高?

 

食品安全检测相关Elisa试剂盒评价标准:

① 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,应大于等于0.9900。

② 灵敏度:反应试剂盒的最低检测浓度

③ 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

④ 重复性:板内、板间变异系数

⑤ 回收率:判断实验的准确性和特异性

 

Elisa试剂盒的标准曲线:

 

标曲R值是几个9才合格?

 

实验室应按检测标准(方法)的要求使用标准溶液或标准物质建立标准曲线。所用标准溶液或标准物质应覆盖被测样品的浓度范围。检测标准(方法)如无具体的要求,至少使用5个标样(除空白外)建立线性标准曲线,每个点重复测定1-3次,对于筛选方法,线性回归方程的相关系数不应低于0.98,对于确证方法,相关系数不应低于0.99。

 

其实,大于0.99是判断是否为线性相关的一个标准,实际应用中线性大于0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半(中间浓度)的位置才比较准确,如果线性大于0.999的话,在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。

 

如果检测的线性不好,可以减少标准的覆盖范围,将标准的浓度调整到待测样品浓度附近,这样结果也是非常准确的。例如,样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线,但线性非常不理想,这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间,作五个标准。

 

在这里,我们给大家带来美国著名的生物检测工具供应商Biovision开发了一系列的我们准确性高,灵敏度高,特异性好,重复性好,可以检测检测各类食品,饲料,组织及生物液体中真菌毒素、抗生素、食品添加剂以及其他细菌蛋白的ELISA试剂盒:

 

  1. 抗生素类:

检测食品中抗生素的残留

样本类型:组织、血清、牛奶、鸡蛋和其他生物样本

 

指标 货号 灵敏度 样本
氨苄青霉素 E4350 2.5 ng/ml 血清,尿液,牛奶,组织
氯霉素 K4230 0.025 ng/ml 组织,牛奶,蜂蜜,记蛋
庆大霉素(血清/尿液) K4315 0.3 ng/ml 血清,尿液,牛奶,组织
庆大霉素 K4206 0.3 ng/ml 牛奶,组织
异烟肼 K4765 0.1μg/ml 血清
卡那霉素 K4210 0.5 ng/ml 组织,牛奶,奶粉
喹诺酮 E4530 0.12 ng/ml 血清,尿液,牛奶
链霉素 E4272 0.1 ng/ml 组织,蜂蜜,牛奶,奶粉
四环素 E4273 0.05 ng/ml 组织,蜂蜜,鸡蛋
万古霉素 E4605 12.8 ng/ml 血清,尿液
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庆大霉素
以 庆大霉素 (serum/urine) ELISA Kit(K4315)为例

 

  1. 真菌毒素:

真菌毒素是真菌产生的低分子量次级代谢产物

样品类型:玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

 

指标 货号 灵敏度 样本
赭曲霉毒素A(OTA) E4746 0.1 ppb 饲料、谷物
总黄曲霉毒素 E4747 0.02 ppb 酒、酱油、醋、谷物、花生、
配方饲料、食用油
T-2毒素 E4748 0.05 ppb 玉米、大米、豆类、花生、燕麦、饲料
伏马菌素B1 E4749 0.5 ppb 谷物、花生、饲料
脱氧雪腐镰刀菌烯醇 E4750 3 ppb 大米、小米、面粉和其他作物/饲料
黄曲霉毒素M1 E4566 0.02 ppb 牛奶、奶粉
黄曲霉毒素B1(AFB1) K4208 0.05 ppb 食用油、大米、花生、玉米
玉米赤霉烯酮(ZEN) E4276 0.3 ppb 谷类及复合饲料

 

  1. 食品添加剂:

食品受到生物和环境污染物的污染发生在生产和加工的几个阶段

样品类型:牛奶、肉类、玉米、谷物、花生、大米、大豆,等。

 

指标 货号 灵敏度 样本
沙丁胺醇 K4209 0.1 ppb 猪尿、组织、饲料
磺胺单甲氧嘧啶 E4774 0.05 ppb 组织、血清、尿液、蜂蜜、牛奶
磺胺甲氧基二嗪 E4775 0.5 ppb 组织,血清,尿液,蜂蜜,牛奶
呋喃妥因(AHD) E4275 0.05 ppb 奶粉,牛奶,纸巾,鸡蛋,肝脏,蜂蜜,鱼,虾
磺胺喹恶啉 E4773 0.05 ppb 组织,血清,尿液,蜂蜜,牛奶,饲料

 

  1. 宿主细胞蛋白:

表达蛋白经过几个纯化步骤后,宿主细胞蛋白仍然可以以较高浓度存在,甚至会与原料药一起纯化和浓缩

样品类型:细胞裂解液、其他生物液

 

指标 货号 检测范围 样本
CHO 宿主细胞蛋白 E4537 0.1-100ng/ml 细胞裂解液,其他生物液体
大肠杆菌蛋白 E4451 1.5-160ng/ml 血清、血浆、尿液、细胞培养样品、生物液体
BSA E4466 6.25-400ng/ml 人血清,血浆,细胞培养上清液,组织匀浆和其他生物液体
QuickDetectTM BSA ELISA Kit
QuickDetectTM BSA ELISA KitE4466

  1. 其他毒素:

双酚A和三聚氰胺

指标 货号 检测范围 样本
双酚A(BPA) E4722 0.4-30 ppb 细胞裂解液,其他生物液体
三聚氰胺 E4274 2-162 ppb 奶粉、牛奶、纸巾、饲料、鸡蛋、血清
双酚A和三聚氰胺
双酚A ELISA Kit(E4722)

 

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