直击免疫沉淀痛点，Rockland热销TrueBlot系列IP产品等你来！

 常规免疫沉淀（IP）的痛点：

免疫沉淀（IP）后的免疫印迹（WB）过程中必然涉及到免疫沉淀用一抗(多为IgG)的变性，因此如果使用传统的二抗(非还原和还原型的IgG均能检测到)会在印迹膜上出现杂带的干扰，也就是说，由于传统的二抗能与还原型的IgG结合，在印迹膜上显示出~55kDa的重链条带和~23kDa的轻链条带，这些均为非特异性条带，对免疫印迹结果的分析带来很大干扰。

为什么要选择TrueBlot ？

TrueBlot^®产品线旨在解决在对免疫沉淀 (IP) 或共免疫沉淀 (Co-IP) 样品进行蛋白质印迹时遇到的常见实验问题。TrueBlot^®二抗的独特检测特性可识别天然（非还原）形式的 IgG而不是还原形式的 IgG，以消除 IP 抗体变性重链和轻链的干扰，当与TrueBlot^® IP微珠搭配使用时，TrueBlot^®产品系列可助您轻松获得可重现的、出版质量的IP/Co-IP-Western印迹结果。

TrueBlot产品介绍及结果展示：

1. HRP标记TrueBlot^TM系列二抗

TrueBlot^TM系列二抗为美国ROCKLAND公司的专利产品，因为TrueBlotTM系列二抗能够特异性的结合带有天然二硫键结构的IgG(Goat, Mouse或Rabbit)，因此能够仅检测非还原型的IgG（一抗IgG天然构象）。

使用TrueBlot^TM系列二抗则可避免上述情况，特异地检测出免疫沉淀而得的抗原(如下图）。

当使用IP分离蛋白时，捕获抗体与目标蛋白质结合（Step 1），添加Protein A 或Protein G 包被的磁珠以固定抗体-目标蛋白质复合物（Step 2）并洗掉不需要的材料（Step 3）。常规IP中的最后步骤通常包括使用加热和还原/变性剂使蛋白质变性（Step 4）。   当洗脱的IP样品通过SDS-PAGE分离（Step 5），后续Western blot中使用的相同一抗进行检测，然后分别使用常规二抗和TrueBlotTM二抗检测时，结果表面：使用常规二抗检测时，捕获抗体的重链和轻链都可以检测到（Step 5 右图），这可能会掩盖您感兴趣的蛋白，特别是如果它的大小与IgG重链或轻链相近时，使用TrueBlotTM二抗检测时，只检测到特异性的目的蛋白（Step 5 左图）。
用anti Mouse IgG TrueBlotTM检测结果	用传统的HRP标记anti-Mouse IgG二抗进行检测结果

由结果可知：用传统的HRP标记二抗检测时会出现轻链和重链条带，而用TrueBlot^TM二抗检测时则没有，表明TrueBlot^®二抗仅识别天然（非还原）状态的一抗，消除重链和轻链条带的干扰，以为免疫沉淀样品提供准确、出版质量的WB结果。

2. 荧光标记TrueBlot二抗：

Fluorescent TrueBlot是一款功能强大、特异性高的产品，可与近红外染料搭配使用。

Fluorescent TrueBlot®:Anti-Rabbit IgG DyLight™ 680的western blo结果： Lane 1: Rabbit IgG, 非变性. M: Marker. Lane 2: Rabbit IgG, 变性.

3. TrueBlot^TM系列微球

Mouse TrueBlot IP琼脂糖珠VS传统IP磁珠

TrueBlot产品特点：

1、完全排除的免疫沉淀用一抗重轻链的干扰，结果清晰、准确，特异性强；

2、使用简单，仅将传统的二抗替换成TrueBlot^TM系列二抗即可。

注意要点：

1、需对免疫沉淀物进行彻底还原；

2、免疫印迹时需用牛奶作为封闭液，而不能用BSA(牛血清白蛋白)，因为后者的封闭作用不强；

3、当用Rabbit IgG TrueBlot^TM对免疫印迹膜进行检测时，要先用anti-IgG微球来进行免疫沉淀步骤，而不能使用Protein A或Protein G微球，因为后者与Rabbit IgG有很强的亲合力，会引起污染。

TrueBlot系列产品推荐：

*上述产品仅限用于科研学术研究用途，不得用于医疗与诊断。

如何做好IP/Co-IP实验，TrueBlot产品选择指南：

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来源：Rockland热销TrueBlot系列IP产品，真IP无干扰

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