前情回顾：PK Mito——诺奖学者点赞&PNAS封面文章的超分辨线粒体探针
鉴于可用的固定探针有限，对线粒体超微结构进行超分辨率激发发射耗尽(STED)成像主要使用活细胞。为了解决这个问题，研究人员通过一种新兴的生物偶联策略，成功开发了一种名为PK Mito Orange FX (PKMO FX)的可醛固定线粒体探针。这种探针具有光学优势，能够在固定前后保持强荧光信号，实现了纳米级STED成像。这一突破将有助于推动线粒体研究的超分辨率成像技术的普及化，为更广泛的科研和应用提供了强有力的工具。PK Mito Orange FX的开发标志着在线粒体研究领域取得了重要进展，并为相关领域的深入探索和发现打开了新的可能性。
化学固定标本的荧光标记技术，尤其是免疫标记技术，在超分辨率成像中发挥着至关重要的作用，它为线粒体等细胞结构或生物分子的分布提供了一种方便、精细的方法。
尽管各个供应商开发了各种不同的探针，可以对活细胞中的线粒体进行超分辨受激发射耗尽(STED)成像，但大多数这些膜电位依赖性荧光团在化学固定后不能很好地保留在线粒体中。缺乏合适的线粒体探针限制了线粒体对活细胞样本的STED成像。 Genvivo引入了一种线粒体特异性探针PK Mito Orange FX (PKMO FX)，它具有固定驱动的交联基序，并在线粒体内膜中积累。它在化学固定后具有高荧光保留率，在775 nm处有效耗尽，可以在醛固定前后进行纳米级成像。
目前Genvivo证明了该探针与常规免疫标记和其他常用的固定样品荧光标记策略的兼容性。此外，我们发现PKMO FX促进了相关的超分辨率光学和电子显微镜，使多色荧光图像和透射电镜图像通过线粒体模式的相关性。我们的探针进一步扩展了线粒体工具包，用于纳米分辨率的多模态显微镜。
成像结果赏析：
目前PKMITO®系列主要供应3款不同颜色的探针：
| 产品名称 | 货号 | 包装 | 适用范围 | 保存条件 |
| PK Mito Red | PKMR-1 | 25nmol | 荧光显微镜、Confocal、SIM | -20℃，避光 |
| PK Mito Orange | PKMO-1 | 25nmol | 荧光显微镜、Confocal、SIM、STED | |
| PK Mito Deep Red | PKMDR-1 | 25nmol | 荧光显微镜、Confocal、SIM | |
| PK Mito Orange Fix | PKMOF | 10次/50次 | 荧光显微镜、Confocal、SIM、STED | -20℃，避光 |
参考文献：
1、Chen, Jingting, et al. "An aldehyde-crosslinking mitochondrial probe for STED imaging in fixed cells." Proceedings of the National Academy of Sciences 121.19 (2024): e2317703121.
