一氧化氮(nitric oxide,NO)广泛分布于生物体内各组织中,特别是神经组织中。它是一种新型生物信使分子,1992年被美国Science杂志评选为明星分子。1998年,3位研究一氧化氮生物学功能的科学家因发现一氧化氮作为心血管信号分子共同获得诺贝尔生理学医学奖。
一氧化氮(即血管内皮舒张因子),在生物体内作为一种反应性极强的自由基,兼有第二信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在哺乳动物体内参与许多生理和病理过程,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,调节血流,介导细胞毒效应和免疫调节,参与学习和记忆、动脉粥样硬化等作用;所以一氧化氮定量有重要的意义,血清中一氧化氮浓度的变化可以反映败血症、休克、高血压、肿瘤和自身免疫等疾病的生理病理变化。
NO信号通路图
为您推荐高通量,方便,灵敏,简单的Abbkine CheKine™ 一氧化氮检测试剂盒
CheKine™ 一氧化氮检测试剂盒产品详情如下:
产品名称 | 货号 | 检测方法 | 规格/价格 |
CheKine™ 一氧化氮检测试剂盒 | KTB1400 | 格里斯试验法 | 48T 400元 96T 600元 192T 900元 |
检测原理:格里斯试验法是检测NO2-的特效反应,在醋酸性介质条件下,用对氨基苯磺酸和α-萘胺与亚硝酸根离子(NO2-)反应,生成红色偶氮化合物;对氨基苯磺酸和α-萘胺醋酸性的混合溶液称为格里斯试剂(Griess reagent)。
该试剂盒基于VCl3 将硝酸盐还原为亚硝酸盐,采用改进的格里斯法来检测亚硝酸盐,生成一种有色产物在540nm处的OD值与亚硝酸盐含量成正比,从而实现对一氧化氮浓度的测定。
多样本适用:血清,血浆,组织/细胞样本,尿液和其他生物液体
Abbkine CheKine™ 一氧化氮检测试剂盒组分:
NaNO2 标准品 (1M)
格里斯试剂 I
格里斯试剂 II
VCl3 试剂
ZnSO4
操作流程:
1.工作试剂准备。 对于每个反应孔,准备204μL工作液,通过混合104μLVCl3试剂,50μL格里斯试剂I和50μL格里斯试剂II。 建议每次试验开始时新鲜配制。
2.反应。 将100μL稀释的标准品和样品加入分开的标记的反应管中(我们建议至少重复测量样品),然后加入200μL工作液/样品到反应管中,混合均匀。
3.在37°C孵育反应30分钟。
4.短暂离心反应管以沉淀任何冷凝物并转移250μL上清到96孔板中的反应孔中,读取540 nm处的OD。
NO浓度计算公式 =(OD样本-OD空白/ 标曲的斜度) *样本数
注意事项:
1.检测范围:1-100 µM
2.建议对样品设置几个稀释度,以确保读数在标准值范围内
3.为保证实验效果,使用新鲜样本是必要的。如果不立即检测,样品可以在-80℃保存一个月。
标准曲线
Y轴: OD540,X轴:NO2-浓度 (μM)。
Abbkine专注于免疫学和细胞学领域,致力于创新和研发各类抗体、蛋白质、分析试剂与试剂盒,以期成为生命科学研究发展、药物研发等领域的关键推动者。在这里,我们为您呈献蛋白和免疫研究用户最喜爱的产品,从免疫学基础产品,如蛋白提取定量,到免疫学实验的内参标签抗体、一抗及二抗等;细胞研究用户最喜爱的产品,从用于检测细胞状态的染料及试剂盒,细胞器提取试剂盒,细胞亚结构染色示踪及细胞代谢检测产品,到用于细胞培养的细胞因子及蛋白类检测试剂盒,只为助力您的研究事业!
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