线粒体在细胞代谢、生物能量学和细胞凋亡中发挥核心作用。已知线粒体功能降低是导致各种器官中药物相关毒性的主要因素。FDA越来越重视评估候选药物的有丝分裂毒性效应，这增加了在药物开发过程早期确定此类效应的重要性。
评估线粒体功能状态的基于细胞的检测方法正在成为阐明线粒体活动在药物诱导的细胞毒性、细胞凋亡级联和其他细胞和生化过程中的作用的有用工具。线粒体膜电位（MMP）的丧失往往与细胞凋亡的早期阶段有关。MMP的崩溃与线粒体通透性转换孔的打开相吻合，导致细胞色素C释放到细胞质中，这反过来又触发了凋亡级联中的其他下游事件。
艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐Enzo Life Sciences品牌特色的MITO-ID® 系列的线粒体膜电位检测试剂盒。产品仅限用于科研学术研究用途，不得用于医疗与诊断。
MITO-ID®线粒体膜电位检测试剂盒用一种阳离子染料测量线粒体膜电位，根据膜电位状态发出绿色或橙色的荧光。在有能量的细胞（膜电位较高）中，染料在细胞质中以绿色荧光单体存在，同时在线粒体中以橙色荧光聚集体的形式聚集。然而，在线粒体膜电位受损的细胞（膜电位较低）中，染料主要以绿色荧光单体存在于整个细胞质中，在线粒体中不再表现出橙色荧光。
Enzo的MITO-ID®线粒体膜电位检测试剂盒的优势：
- 比JC-1荧光染料灵敏10倍，水溶性好；
- 耐光双发射染料；
- 无需漂洗/换液过程；
- 单独的MITO-lD测定可用于检测线粒体质量；
- 在较低的药物/剂量浓度下检测细胞毒性；
- 没有像JC-1配方那样的溶剂伪影；
| 产品名称 | 货号 | 试剂盒中的染料 | 应用 |
| MITO-ID® Membrane potential detection kit MITO-ID®线粒体膜电位检测试剂盒 |
ENZ-51018 | MITO-ID® MP Detection Reagent（Ex/Em：490/525, 590nm） Necrosis Detection Reagent（Ex/Em：546nm/647nm） |
荧光显微法，流式细胞术 |
| MITO-ID® Membrane potential cytotoxicity kit MITO-ID®线粒体膜电位细胞毒性试剂盒 |
ENZ-51019 | MITO-ID® MP Detection Reagent（Ex/Em：490/525, 590nm） | 荧光酶标仪 |
Enzo的MITO-ID®线粒体膜电位检测试剂盒的作用机制：
该染料的基本化学结构由高度共轭的部分组成，使正电荷广泛离域，从而允许电泳吸收到极化的线粒体内膜的带负电荷的基质相。该染料能够选择性地进入线粒体，当膜电位增加时，它的颜色会从绿色可逆地变为橙色（双发射电位探针）。这种光物理特性是由于在膜极化时可逆地形成J-聚集体，导致在490nm处激发时，发射光从～530nm（单体染料的发射）转移到590nm（J-聚集体形式的发射）。因此，具有低膜电位的线粒体将积累低浓度的染料，并表现出绿色荧光，而更高极化的线粒体将表现出橙色的荧光。
Enzo的MITO-ID®线粒体膜电位检测试剂盒的应用：
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产品货号：ENZ-51018 HeLa细胞的线粒体用 MITO-ID®膜电位染料染色，并通过落射荧光显微镜观察。橙色荧光聚集体定位于线粒体（橙色通道），而绿色荧光单体主要染色细胞质（FITC通道）。 |
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产品货号：ENZ-51018 对照组和处理组细胞的流式细胞术分析。Jurkat细胞未经处理（左），用1μM CCCP处理15分钟（右）。然后用MITO-ID®膜电位染料对细胞进行染色，并在FACS Calibur仪器上运行。 |
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产品货号：ENZ-51019 检测线粒体变动的灵敏度是JC-1的10倍。使用MITO-ID®膜电位染料（红色）或JC-1（蓝色）在经CCCP处理的HeLa细胞中评估线粒体膜电位（MMP）。使用传统的荧光酶标仪，MMP 显示出随着CCCP浓度的增加而减少，如橙色荧光的减少。 |
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产品货号：ENZ-51019 在药物筛选中实时检测有丝分裂毒性。使用BioTek Synergy™ Mx荧光酶标仪对线粒体膜电位变化进行时间进程研究。HeLa 细胞与MITO-ID®膜电位染料在室温下孵育30分钟（不去除血清或培养基）。添加鱼藤酮以达到1µM、3µM和9µM的浓度。染料被证明对鱼藤酮有反应，橙色信号的减少证明了这一点。 |
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来源：Enzo丨MITO-ID 系列的线粒体检测分析：线粒体膜电位
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