侧向流动检测(LFT),高效快捷

 

2019年冠状病毒病(COVID-19)正在影响整个全球市场,除了人的生命成本外,病毒传播对全球经济产生了巨大的影响,同时也对世界技术供应链产生深远的影响。

 

截至近期,新冠患者全球累计确诊破1170万,基于最新调研全球主要国家,或许能在2-3季度控制住疫情,并在第4季度逐步复工复产,由于目前COVID-19的诊断主要依靠血清学检测和核酸检测,而血清学检测由于其简便快捷的检测方法,能够很好的满足如此大批量的检测需求。

 

血清学检测

 

什么是血清学检测?

血清学检测可用于诊断和鉴定血清或其他体液样本中的抗体。由于抗体是作为免疫反应的一部分而产生的,因此,对于感染因子(例如微生物或病毒体)特异性的抗体的存在表明患者已(或已经)感染。血清学检测的其他应用包括诊断自身免疫性疾病或血液和组织类型。

 

进行血清学检测的必要性:

与聚合酶链反应(PCR)或病原菌培养检测方法相比,血清学检测结果对疾病的感染过程提供了不同的见解。血清学检测可以确定人群中已被感染并产生相应抗体的“无症状感染者”以及感染后通过自身免疫系统产生相应抗体达到自愈的人群,基于检测样本中抗体的血清学检测可以快速,经济,高效,直观地提供结果。

 

血清学检测原理:

血清学测试的主要方法是将传染原/致病性抗原直接包被或将捕获抗体包被在样品孔或其他基质表面上,加入样品,如果样本中存在相应的抗体,抗体将结合抗原。洗去未结合的物质,并用与报告分子(例如辣根过氧化物酶(HRP),40nm Gold颗粒或生物素)偶联的二抗检测抗原抗体复合物,然后使用结合了报道分子的链霉亲和素对信号进行扩增。

 

检测方法有哪几种

酶免疫测定(EIA),荧光免疫测定(FIA),ELISAELISpot,侧向流动检测(LFT)(也称为快速检测)是血清学检测的不同形式。一些检测方法还可设计用于同时对数百个样品进行自动高通量筛选。

 

侧向流动检测(Lateral flow tests)

侧向流动测试之类的快速测定由于它使用方便,能够快速提供检测结果,同时允许进行即时分析,可很好的替代在实验室中进行的更耗时的免疫分析。快速检测可用于定性检测患者体内产生的抗体,检测结果可服务于临床诊断并指导治疗方案。

 

工作原理如下:

横向流动或快速测试使用的是免疫层析原理-通过毛细管作用使检测样本横向流过基质,使抗原与抗体结合,从而使这些复合物达到检测和可视化目的。

免疫层析原理

 

步骤1. 横向流动试纸条通常由样品垫,已用标记抗体(例如,胶体金金标记的山羊抗人Fcγ特异性抗体)包被的缀合垫和两条“线”(已涂有抗原的硝酸纤维素膜)(T线)和对照抗体,例如牛抗山羊(C线)组成。

胶体金金标记的山羊抗人Fcγ特异性抗体

步骤2. 在测试条中的孔中加入样本。

侧向流动检测

 

步骤3. 毛细管作用将样品吸入包被有金标二抗的区域,形成金标抗体复合物。样品中能与金标抗体特异反应的任何抗体都将形成抗体复合物。

金标抗体复合物

 

步骤4. 随后样品和复合抗体迁移到包被有抗原(能跟样本中的抗体特异性结合)的硝酸纤维素的检测线(T线)上。

硝酸纤维素的检测线

 

步骤5. 如果样品中的抗体与包被的抗原能发生特异性反应,则抗体复合物将发生沉积并在整个T线上显色,从而直观指示为“阳性”。如果测试样品中没有针对抗原的特异性抗体,则不会出现显色。未被结合的金标山羊抗人抗体继续通过试纸条迁移至对照线(C线)上。

金标山羊抗人抗体

 

步骤6. C线上包被有牛抗山羊IgG,可以捕获游离的金标山羊抗人抗体,并显示一条彩色线表示测试已正确执行,如果控制条带不显色表示检测无效。

 

控制条带显色

 

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兔抗人 IgM, Fc5µ 片段特异性
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交叉吸附相关信息会在对应产品说明括号中提供,表示为“ min X”,“X”为相关物种的缩写。Note:Bov:牛;Hrs:马;Ms:小鼠;Rb:兔子;Sr Prot:血清蛋白

 

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