hEGF：人表皮生长因子，是人体内的一种多肽激素，由53个氨基酸残基组成，属于类EGF大家族的一个成员，广泛应用于医药和化妆品行业。该多肽不仅可以刺激细胞增殖，分化和迁移，还可以在伤口愈合，器官生成和细胞信号转导中发挥极其重要的作用。它是一种多功能的生长因子，在体内体外都对多种组织细胞有强烈的促分裂作用。
hEGF基因已在各种异源表达系统中成功表达。大肠杆菌是异源蛋白质表达的优选生物之一，被认为是生产商业重组hEGF的最简单和最便宜的表达系统。然而，对于三个分子内二硫键，天然hEGF（没有额外的氨基酸残基）不可能正确折叠并且不易在原核表达系统中可溶性表达。
因此使用各种标签蛋白融合系统，例如6x组氨酸，硫氧还蛋白和谷胱甘肽-S-转移酶，已用于表达和纯化重组hEGF；然而，这些方法在可溶性表达，标签切割和纯化方面不具有高效性。对具有生物活性的hEGF在大肠杆菌中借助信号肽和几种真核系统如Saccharomyces cerevisiae（酿酒酵母），Yarrowia lipolytica（解脂耶氏酵母），和Hansenula polymorpha（多形汉森酵母）的细胞外表达进行了研究，与细胞内表达相比，显著降低了hEGF的产量。
由于对hEGF的浓厚兴趣，研究人员对hEGF生物合成的研究从未停止过。 为了解决上述问题，尤其是低效的可溶性表达，一些研究人员采用了一种有效的SUMO融合策略（该策略已广泛应用于靶蛋白的可溶性表达），以产生和纯化带His标签融合的hEGF。然而，SUMO和基于afnity标签的表达系统需要SUMO蛋白酶在蛋白纯化中切割SUMO标签。添加该蛋白酶不仅成本高，而且还需要额外的步骤以将蛋白酶与纯化的hEGF蛋白分离。
但有文献报道，天然hEGF通过蛋白质融合策略在大肠杆菌中表达为可溶形式，该方法可通过MTT测定鉴定重组hEGF的活性。在该研究中，hEGF基因与内含肽，SUMO和组氨酸亲和标签一起使用以在大肠杆菌中实现可溶性表达，然后进行有效的纯化和活性测定。 将重组质粒hEGF-Mxe-SUMO His10转化到BL21（DE3）中。在20mM DTT诱导的C末端内含肽切割后获得约29.4mg/L生物活性的hEGF。该新方法显著提高了大肠杆菌体内系统中可溶性部分中hEGF的表达水平，使其更易于纯化，并在还原系统中产生含有多个分子内二硫键和天然生物活性的重组hEGF。
