在前面的《浅谈流式细胞仪的工作原理和应用》一文中我们给大家简单介绍了在细胞领域运用广泛的流式细胞仪,现在我们再给大家推荐一种非常适合高通量药物筛选和各种细胞相关实验的新型仪器-Celigo全视野细胞成像分析仪。
Celigo Image Cytometer全视野细胞扫描分析仪是一款新科技的细胞全孔高速扫描成像分析仪,可分析生长在微孔板和T-flask中的贴壁和非贴壁(悬浮)细胞,具有超越传统方法的更好的优势。Celigo具有特别一致的,高质量,全孔的明亮视野(brightfield)成像功能,结合强大的分割软件可在5分钟内获得整个微孔板的所有孔中的所有细胞的高质量数据。Celigo具有非破坏性和非侵入性明亮视野分析功能,并有多色荧光功能作补充,使系统适合任何实验室中的基于细胞的广泛的实验。
作为一款理想的高通量药物筛选和适合各种细胞实验的新型仪器其具有以下特点和优势:
- 运转速度快——Celigo扫板与分析速度极快且多孔自动成像
- 数据零遗漏——Celigo全孔成像
- 样本无干扰——Celigo原位无损伤与明场无标记
- 兼容性强——Celigo可接受T-flask(T-25和T-75)和多数微孔板(1536孔板到6孔板)
- 具有三通道荧光——Celigo除了明场功能外还有红色、绿色和蓝色荧光
- 直观简便的软件——Celigo可选择的API软件,可进行机械臂装载整合
接下来我们详细介绍下它的优越性能:
首先,其分辨率足够高,达到1um成像精度,相当于显微镜15X放大倍数,对于处理单个细胞的信号识别是足够清晰完整的。
Celigo的典型图像如下:
(图片来源达科为官网)
那么,在这种成像精度下,如何实现对1536孔,384孔,96孔,24孔,甚至6孔板的全孔成像呢?这涉及到其采用的一个独特光学技术,应用一个大型的F-theta透镜和电磁检流计镜片来对全孔进行大面积快速扫描。其技术原理图如下。在该技术下,透镜的位移完全由电磁推动,安静快速而完全没有机械位移,其精度可小于1um,从而保证了后续的多图像拼接保持了一致性。
(图片来源达科为官网)
这就带来了细胞大规模图像分析的几个好处:
1.原位in situ
在细胞生长的过程中无需消化细胞,无需取样,无需进行任何处理,可在任何时间点随时成像,随时分析,随时获得统计学数据处理结果。
(图片来源达科为官网)
2.全孔 full well
如6孔板一个孔的完整细胞图像,由256张细胞图像拼接而成;96孔板一个孔的完整细胞图像,由16张细胞图像拼接而成。由于每个孔均是高清晰度的全孔细胞分析,从而保证了统计学意义的一致性。(孔与孔之间由于细胞加样量的差异,细胞生长的差异,悬浮沉降细胞移动导致的固定小视野不能准确追踪等问题均得到解决。)
(图片来源达科为官网)
- 全孔照明亮度的均一。这是由于扫描光路的特性带来的。图像见下:
(图片来源达科为官网)
- 快速。这是系统的扫描光路电磁透镜技术带来的。其处理全孔高精度图像分析下的处理速度如下:
Plate Type | Images / Well | Resolution(mm/pixel) | Typical Time (min) |
1536 well | 1 | 2 | <6 min |
384 well | 1 | 2 | <2 min |
384 well | 4 | 2 | <5 min |
96 well | 16 | 2 | <3.5 min |
96 well | 16 | 1 | <10 min |
5.整板whole plate
整板的全孔图像预览和曲线分析带来一目了然的细胞分析结果,而这一切均在<10min的速度下完成,从而简单实现多时间点的整板细胞生长分析快速追踪。
适用于各种规格细胞培养板(6/12/24/96/384/1536孔板)和培养瓶(T-25和T-75)。
6.多通道multi channels
共有四个通道,采用四个独立的LED光源,包括一个高质量的明场通道,和三个荧光通道。标配:
- 蓝色荧光:ex/em377/477(e.g., Hoechst, DAPI)
- 绿色荧光:ex/em483/536(e.g., FITC, Calcein, Alexa Fluor 488, GFP)
- 红色荧光:ex/em531/629 (e.g., PI, Texas Red, Alexa Fluor 568)
选配:可替换以上三个荧光的任一通道
- Far-Red (e.g. Alexa Fluor 647, DRAQ5)