细胞分裂周期因子25(Cdc25)检测——蛋白磷酸酶Cdc25组合荧光检测试剂盒解决方案

 

我们知道癌症最重要的特征就是细胞的恶性增殖,而细胞增殖又少不了细胞分裂周期基因(cell division cycle,Cdc)的参与。细胞周期中必需的Cdc25基因所表达的细胞分裂周期因子25(cell division cyclin25,Cdc25)属于细胞周期调控蛋白,在真核生物的细胞有丝分裂中起重要调控作用,是细胞周期关键因子之一,目前,Cdc25也已逐渐成为癌症治疗的潜在靶标。

 

细胞分裂周期基因

 

细胞分裂周期的进程是通过CDC25磷酸酶激活一组特殊的细胞周期依赖性蛋白激酶CDK进行调控的。CDC25蛋白能特异性地脱去CDKs酪氨酸/苏氨酸残基上的磷酸基团去磷酸化,参与细胞周期调节并调控应对DNA损伤,在正常的细胞周期中具有重要的作用。哺乳动物至少有3种CDC25磷酸酶亚型,分别为CDC25A、CDC25B和CDC25C。近年来的研究显示,CDC25A主要在细胞的G1/S期转变中发挥作用,CDC25B在S期被激活,继而在细胞质中激活CDK1(Cdc2)/周期蛋白B,被活化的CDK1/周期蛋白B再激活CDC25C,通过正反馈机制调控有丝分裂。

 

研究表明,Cdc25在多种癌症中过表达。Cdc25磷酸酶的两种亚型Cdc25A和Cdc25B,一种或两种同时在多种癌症中过表达,如乳腺癌、肺癌、卵巢癌、结肠癌、食道癌、胃癌、肺癌、肝细胞癌、非小细胞肺癌、非霍奇金淋巴瘤、胰导管癌、甲状腺和头颈癌等.目前也有研究证实CDC25C功能的失调将导致肿瘤的发生。因此,以磷酸酶Cdc25为靶标的抑制剂药物的研发,对于开发抗肿瘤药物具有重要意义。

 

艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商,为您推荐Abnova品牌细胞分裂周期因子25(Cdc25)检测试剂盒——蛋白磷酸酶Cdc25组合荧光(人)检测试剂盒,可用于高通量蛋白磷酸酶Cdc25A、Cdc25B和Cdc25C的抑制剂和调节剂的筛选:

货号 名称 说明
KA0086 Protein Phosphatase Cdc25 Combo Fluorometric (Human) Assay Kit 蛋白磷酸酶Cdc25组合荧光(人)检测试剂盒 一种荧光和非放射性检测试剂盒,旨在通过检测Cdc25A,Cdc25B和Cdc25C蛋白酶活性,筛选Cdc25A,Cdc25B和Cdc25C的蛋白酶抑制剂和调控因子。

 

蛋白磷酸酶Cdc25组合荧光(人)检测试剂盒原理:荧光底物邻甲基荧光磷酸酯 (OMFP), 经CDC25去磷酸化后得到的产物邻甲基荧光素 (OMF) 在被482-502nm激发光激发后可发射出波长为510-540 nm的可检测的荧光信号, 通过观察荧光信号的强弱,得到抑制剂或调节剂对蛋白磷酸酶Cdc25A、Cdc25B和Cdc25C的抑制情况。

细胞分裂周期因子25(Cdc25)检测试剂盒

结果1——抑制剂分析

 

Cdc25A Cdc25B Cdc25C
钒酸钠对Cdc25A的抑制曲线 钒酸钠对Cdc25B的抑制曲线 钒酸钠对Cdc25C的抑制曲线

 

结果2——Cdc25酶活分析

 

Cdc25A催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线 Cdc25B催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线 Cdc25C催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线
Cdc25A催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线 Cdc25B催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线 Cdc25C催化结构域重组蛋白的剂量酶活曲线

 

结果3——Cdc25酶酶动力学分析

    

Cdc25A的酶活时间曲线 Cdc25B的酶活时间曲线 Cdc25C的酶活时间曲线
Cdc25A的酶活时间曲线 Cdc25B的酶活时间曲线 Cdc25C的酶活时间曲线

 

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