外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质...
ELISA法检测抗体的效价
将特异性抗原包被在固相载体上,加入含待测抗体的样品,使之与固相抗原结合(Ag-Ab),再加入酶标记的抗抗体(亦称二抗),与上述Ag-Ab复合物结合形成Ag-Ab-α...
细胞培养中常见的污染及解决方案
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压...
细胞冻存与复苏注意事项
细胞储存在液氮中,温度达-196℃,理论上储存时间是无限的。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。 在不加任何物...
有限稀释法筛选杂交瘤亚克隆
平均来说,用典型的融合方法制备的杂交瘤,1%~3%的孔会分泌能够与抗原反应的抗体。一旦使用两个独立的筛选试验确定了阳性克隆,这些细胞应该立即进行亚克隆,分离出能够分...
小鼠腹水制备抗体
目前大量制备单抗的方法主要有两大系统,一是动物体内生产法,另一是体外培养法。迄今为止,通常情况下均采用动物体内生产单抗的方法,鉴于绝大多数动物用杂交瘤均由BALB/...
细胞培养时分布不均匀,怎么办?
做细胞生物学实验,细胞铺板大概是我们最常见的一个实验。但有时候铺得不是很均匀:要么中间密周围稀,要么周围密中间秃顶。下面为大家分享几点经验。 &nbs...
贴壁细胞的消化问题
许多同学对细胞消化做了许多研究,得出了很多有价值的经验,也见到很多人的困惑。其实细胞培养,尤其是细胞系的培养,就消化而言,不是太难,做得多了,善于总结经验,就能把细...
常见的蛋白酶抑制剂
在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中,蛋白水解酶就会被释放出来或被激活,影响最终的结果。为了避免这些情况的出现,可以在样品制备...
液氮罐使用注意事项
在细胞培养或其他实验中,常常需要在液氮中保存细胞或组织,用于后续的实验。而液氮罐的不恰当使用往往会导致人体的损伤,细胞样品的丢失。在使用过程中需要注意以下事项: &...