实验技术
包涵体蛋白的纯化
1、包涵体裂解 细胞内重组蛋白的提取要依照蛋白的来源和性质选择合适的方法，蛋白一般来源于细菌、植物、哺乳动物细胞等。 细胞裂解常用的方法有：酶解法、研...
实验技术
实验技术
菌种的保藏方法
各种微生物由于遗传特性不同，因此适合采用的保藏方法也不一样。一种良好的有效保藏方法，首先应能保持原菌种的优良性状长期不变，同时还须考虑方法的通用性、操...
实验技术
细胞转染的注意事项
转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。分为物理介导方法：电穿孔法、显微注射和基因枪；化学介导方法：如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法、和多种阳离子物质介导...
实验技术
实战篇：蛋白不表达的因素
做蛋白表达实验的时候，有时候实验会觉得参考实验方法和克隆的蛋白基因序列完全没有问题，蛋白电泳就是没有结果。就个人经验总结和一些网络资源汇总了下蛋白不表达的原因。 &...
实验技术
双酶切和同源重组法构建载体
基因克隆是分子生物学中的一种基本的操作方法。通过双酶切来构建载体是其中常用的一种方法，这种方法利用限制性内切酶可以识别并切割特定的核苷酸的原理，用两种不同的限制性内...
科研学习
多肽抗原制备多抗的过程简介
1、多肽合成 按照多肽合成常规操作合成多肽，HPLC检测纯度为95%。多肽C端增加的半胱氨酸残基用于以其巯基连接于偶联剂上。 2、合成多...
科研学习
B细胞抗原表位的预测方法简介
抗原表位预测适用于已知一级结构的蛋白质或多肽抗原的线性表位的预测。人们通过观察抗原表位与已知氨基酸序列的蛋白质某些结构特征关系，发现一些蛋白质的序列或结构特征与抗原...
实验技术
目的蛋白表达之总蛋白的提取与分析
对于每个大肠杆菌表达的目的蛋白，确定其产生、定位及估计培养基或细胞中的产量都相当重要。为了简化确定工作，通常对总细胞蛋白及培养液、周质、可溶胞质和不溶胞质部分进行小...
实验技术
合成多肽与重组蛋白作为抗原的区别
目前抗体制备常采用多肽抗原及重组蛋白质抗原，这两种方法各有优缺点，需结合实验需求进行选择。 重组蛋白质抗原上往往带有多个不同的抗原决定簇，其中有些是顺...
实验技术
抗体纯化中常见问题
1、优质的抗体包含的条件： 1).抗体的纯度大于95%（这里的纯度是指有效抗体的含量而不是单纯的电泳纯度）； 2).抗体的活性（效价高）...
