RT-qPCR&IgM/IgG抗体检测,助你“擒拿”新型冠状病毒

 

新型冠状病毒结构示意图

 

一、核酸检测

 

2020年最令人谈虎色变的莫过于新型冠状病毒(2019 Novel Coronavirus, 2019-nCoV)了。处在疫情最严重的城市,武汉艾美捷科技的伙伴们在做好安全防护的同时,时刻关注着疫情防治和病毒诊断的相关信息,更期待能为击退这次疫情助力!今天小艾准备为大家梳理一下新冠病毒检测的常规技术和方法。

 

目前,最常规的检测方法是通过核酸和抗体免疫反应进行检测,核酸检测主要检测鼻咽拭子中的病毒核酸,抗体免疫检测则通常是检测患者血清或血浆样本中的 IgM抗体及IgG 抗体。核酸检测主要用于确诊,免疫检测试剂则多用于筛查。

 

2019-nCoV是一种RNA病毒,它的遗传物质是核糖核酸,其特异性核酸序列是与2019-nCoV其他病原体的标志物。而2019-nCoV核酸检测的目的就是为了在感染患者体内找到该病毒的存在。目前,新型冠状病毒核酸检测普遍采用的是实时荧光定量反转录PCR技术(RT-qPCR)。

 

RT-qPCR核酸检测的技术原理是:利用反转录酶在适当的反应条件下,以疑似患者痰液、鼻咽拭子等样本中提取出来的病毒单链RNA为模板,合成互补链cDNA,再引入特异性扩增引物,通过DNA聚合酶大量富集目标DNA片段,放大病毒核酸的信号;在荧光探针的结合下,每扩增一条特异性的DNA链就会形成一个荧光分子。荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步,通过荧光定量qPCR仪的接收分析,可获得样本的荧光强度增长曲线,再与已知浓度的标准品对比可计算得出该样本中的病毒核酸含量。由于经过设计的病毒特异性引物只能结合病毒的基因序列,因此只有被新型冠状病毒感染的细胞组织或血液样本才能使仪器产生荧光信号,该样本来源才会被确诊为病毒阳性患者。

 

目前,普遍使用的新型冠状病毒核算检测试剂盒组分包括RT-qPCR反应体系(Taq DNA聚合酶、Mg2+等)、一对特异性引物以及一个探针,该探针为新型冠状病毒的一段特异性寡核苷酸序列。艾美捷科技可提供RT-qPCR试剂盒助力新型冠状病毒核酸检测:

 

货号 名称 规格
08-55-00250 SOLIScript 1-step Multiplex Probe Kit 250reactions

 

该产品是基于多重荧光RT-PCR原理,可以以冠状病毒RNA为模板进行多重定量PCR反应,有效检出冠状病毒的ORF1ab、N基因和E基因。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。

 

产品特点:

 

  • 特异性好,灵敏度高:本产品使用DNA/LNA水解探针法与高品质热启动taq DNA酶,检测灵敏度和特异性通常要显著高于使用SYBR Green等荧光染料的方法。
  • 可用于多重检测:最多可进行多达四重的反应,可同时有效检出冠状病毒的ORF1ab、N基因和E基因。
  • 操作简单,使用便捷:本产品包含RT-qPCR所需的通用组分,用户只需自备引物、探针、样品RNA。
  • 逆转录和qPCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,反应体系兼容UDG/dUTP防污染系统,降低了污染风险。

 

二、抗体检测法

 

与核酸检测相比,抗体检测样本为血清或血浆,受样本采样的影响较小,有利于早期诊断和排除可疑病例,同时检测方便、快速、适合大规模筛查。

 

IgG和IgM是最常用的传染病抗体标志物。人体在接触外来病原体的时候,最早产生的抗体是IgM——通常用作急性感染的标志物,由B细胞表面受体直接分泌,产生IgM的B细胞进入淋巴结,在进一步成熟后,分化为浆细胞,大量产生IgG(可作为恢复期的标志物)。因此,应尽量釆集患者急性期(最好在发病后7天内)、恢复期(发病后第3~4周)双份血清用于新冠病毒抗体的测定。艾美捷科技可提供抗IgM或抗IgG,助力新型冠状病毒IgM/IgG抗体检测试剂盒以及检测试纸的生产与研发:

 

货号 名称 规格
2020-01 Goat Anti-Human IgM-UNLB
山羊抗人IgM
1mg
2020-05 Goat Anti-Human IgM-HRP
HRP标记山羊抗人IgM二抗
1ml
2020-08 Goat Anti-Human IgM-BIOT
生物素标记山羊抗人IgM二抗
1mg
2020-09 Goat Anti-Human IgM-PE
PE标记山羊抗人IgM二抗
0.5mg
9020-01 Mouse Anti-Human IgM-UNLB
小鼠抗人IgM
0.5mg
9020-05 Mouse Anti-Human IgM-HRP
HRP标记小鼠抗人IgM二抗
1ml
9020-08 Mouse Anti-Human IgM-BIOT
生物素标记山小鼠抗人IgM二抗
0.5mg
9020-09 Mouse Anti-Human IgM-PE
PE标记小鼠抗人IgM二抗
1mg
2040-01 Goat Anti-Human IgG UNLB
山羊抗人IgG
1mg
2040-05 Goat Anti-Human IgG-HRP
HRP标记山羊抗人IgG二抗
1ml
2040-08 Goat Anti-Human IgG-BIOT
生物素标记山羊抗人IgG二抗
1mg
2040-09 Goat Anti-Human IgG-PE
PE标记山羊抗人IgG二抗
0.5mg

备注:以上仅列举了部分抗人IgM/IgG二抗,更多其他宿主、其他标记的片段化及全分子二抗,详询艾美捷科技

 

血清学IgM/IgG抗体检测对发热病人进行快速初筛,可提高疑似病例确诊率。如针对无症状人群大规模筛查,通过检测IgM、IgG,有利于早期检出,可作为核酸检测的一个互补。 总之,新冠病毒抗体检测可作为RT-qPCR核酸检测的一个互补,它们的联合检测将会显著提高检测的灵敏度,减少误诊率或漏诊率。

 

 

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