PROTAC® 分析板:同时研究PROTAC介导的泛素化和降解

LifeSensors开发了一种高通量的基于平板的方法来直接监测PROTAC介导的靶蛋白的泛素化和降解。该方法快速、高效、定量,适用于内源性蛋白质和细胞系。

 

LifeSensors”PROTAC®

蛋白水解靶向嵌合体(PROteolysis TArgeting Chimeras, PROTACs)已成为靶向不可药物化蛋白质组的新疗法。PROTACs是同时与靶蛋白和泛素(Ub) E3连接酶结合的异双功能小分子。这将会引诱目标蛋白的泛素化和降解。

 

产品背景

 PROTACs作为一种新型成药技术,可以让药物选择性结合致病蛋白质,并通过“泛素-蛋白酶体”系统在细胞内自然降解,因而克服了传统药物抗药性的问题。

PROTAC充当连接器

如图所示,PROTAC充当连接器,帮助E3连接酶标记要降解的靶蛋白。整个过程就好像把你需要扔进垃圾桶的废品打上一个便签,这样的话,凡是打上了便签的靶蛋白,细胞统统都会处理掉。这也正是“泛素-蛋白酶体”系统的工作原理:给需要降解的靶蛋白贴一个“便签”,然后降解掉。PROTAC无疑简化了这个过程并极大的提高了效率。

 

蛋白水解靶向嵌合体

预期用途

 Cat. No. PA950分析板用于PROTAC处理后细胞裂解液中靶蛋白泛素化的相对测定。该方法旨在取代更费力的半定量western blot方法,以检测细胞中靶蛋白的多泛素化和降解,并提供定量和可重复的结果。

 

【测定原理】

 

PROTACs测定原理

 

PROTAC® 分析板是一种基于三明治的分析,其中多泛素化蛋白来自使用专有的多泛素结合试剂将细胞裂解物捕获在预涂层的微量滴定板孔中。通过洗涤除去非多泛素化/未结合的蛋白质,然后添加针对目标蛋白的抗体,然后洗涤。最后,用检测试剂和荧光酶标仪检测结合靶标抗体。

 

PROTAC优势

  • 同时研究PROTAC介导的泛素化和降解;
  • 以建立结合,三重复合物的形成和细胞降解完整的验证研究套件;
  • 新E3连接酶的经验- ~30个E3连接酶符合PROTAC的发现;
  • 蛋白质组学表征蛋白质降解-建立选择性。

 

产品包含

产品 Cat. No. PA950 储存(°C)
包被板 一个 96孔板 -80°C
阻塞浓缩物 (BC) 12 mL 5X阻断剂(抗体稀释) 4°C
密封塑料板: 2个
检测试剂1 (DR1) 1.0 mL 4°C
检测试剂 2 (DR2): 1.0 mL 4°C
泛素蛋白酶体抑制剂MG132 25 µL (10 mM in DMSO) -20°C
PR-619 25 µL (22 mM in DMSO) -20°C
1,10-phenanthroline 100 µL (500 mM in DMSO) -20°C

 

产品链接:https://www.amyjet.com/products/LSS-PA950.shtml

 

【PROTAC分析例子】

 

PROTAC分析例子

PROTAC分析例子

 

LifeSensors成立于1996年,位于美国宾夕法尼亚州费城,是一家为药物发现与研究提供方法和可行性技术方法的生物技术公司。公司致力于为泛素和泛素蛋白酶体通路研究领域提供高品质的抗体、酶、蛋白质等试剂和试剂盒,产品最全、最新,是泛素研究者的最佳选择。其原核和真核蛋白表达系统SUMOpro和SUMOstar已被世界范围内的学术、政府研究机构和制药、生物技术公司广泛应用。通过提供创新的研究工具,LifeSensors已成为泛素和泛素样蛋白途径的领导者。nifeSensors公司目前主要的产品有400多种,其产品主要覆盖泛素和泛素蛋白酶体通路等科学应用领域,并且产品线在不断的扩大中。公司开创了两大独家技术平台:用于细胞信号和药物发现的泛素蛋白酶体系统(UPS),以及增强目的蛋白在大肠杆菌、酵母、昆虫和哺乳动物细胞中表达与纯化的SUMO融合表达系统。

 

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