如何快速测定NAD/NADH,NADP/NADPH,ATP/ADP的含量及其比值

辅因子(Cofactor)是一类可以和蛋白质结合并使蛋白质行使正常催化作用的非蛋白质类化合物,主要包括NAD+/NADH、NADP+/NADPH、ATP/ADP等。

NAD+(烟酸腺嘌呤二核苷酸)和NADH(还原型烟酸腺嘌呤二核苷酸)是细胞内常见的辅酶对。NAD+是一种氧化剂,而NADH是其还原形式,可以在许多生物化学反应中作为电子和氢离子的载体。NAD+/NADH在细胞的能量代谢、呼吸链和许多氧化还原反应中起重要作用。

NADP+(烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸盐)和NADPH(还原型烟酸腺嘌呤二核苷酸磷酸盐)也是一对辅酶。与NAD+/NADH类似,NADP+是一种氧化剂,而NADPH是其还原形式。NADP+/NADPH在许多生物化学反应中起着重要的电子传递和还原作用,尤其在生物合成过程中扮演着重要角色。

ATP(腺苷三磷酸)和ADP(腺苷二磷酸)是细胞内的重要能量分子。ATP是细胞内能量的主要储存形式,当细胞需要能量时,ATP会通过水解反应释放出磷酸根,转化为ADP,同时释放出能量。ADP可以通过其他代谢途径再次合成ATP,形成一个能量循环。ATP/ADP在细胞的能量代谢、信号传递和许多生物化学反应中起着关键作用。

1. NADNADH

NAD、NADH.png

 

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,简称NAD ),由五碳糖,含氮碱基,磷酸基团形成,因为是由两个核苷酸形成的,所以叫做二核苷酸,它是一种转递电子的辅酶,出现在细胞很多新陈代谢反应中,NADH是它的还原形式。 NADH与NAD是细胞中的一对氧化还原对,NADH作为氢和电子的供体,NAD作为氢和电子的受体,参与呼吸作用、光合作用、酒精代谢等生理过程。它们作为生物体内很多氧化还原反应的辅酶参与生命活动,并相互转化。因此,监测其浓度水平一直是人们关注的焦点。NAD/NADH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中具有重要应用价值。

 

货号 BA0067 BA0106
名称 NAD/NADH Assay Kit NAD/NADH Assay Kit
方法 比色法(OD565nm) 荧光法(λex/em = 530/585 nm)
用途 测定NAD, NADH的含量及其比值 测定NAD, NADH的含量及其比值
检测限 0.05uM 0.02uM
样本 细胞或组织提取物 细胞或组织提取物

 

2. NADP、NADPH

NADP、NADPH.png

 

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate,简称NADP)与NAD的不同之处只在于其分子有一个额外的磷酸基,NADPH是它的还原形式。NADP+参与生物合成反应,如脂质和核酸的合成。在动物细胞中,戊糖磷酸途径的氧化阶段是NADPH的最重要来源。NADP/NADPH的定量测定在细胞或组织的能量转化和氧化还原状态的研究中具有重要应用价值。

 

货号 MAES0200 BA0107
名称 NADP+/NADPH Assay Kit NADP/NADPH Assay Kit
方法 比色法(OD450nm) 荧光法(λex/em=530/585 nm)
用途 测定NADP、NADPH含量及其比值 测定NADP、NADPH含量及其比值
检测限 0.02 ?mol/L 0.01 uM
样本 细胞或组织提取物 细胞或组织提取物

 

3. ATP、ADP

ATP、ADP.png

 

三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate,简称ATP)为一种辅酶,有改善机体代谢的作用,参与体内脂肪、蛋白质、糖、核酸以及核苷酸的代谢。同时又是体内能量的主要来源,当体内吸收、分泌、肌肉收缩及进行生化合成反应等需要能量时,三磷腺苷即分解成二磷酸腺苷(ADP)及磷酸基。通过ADP/ATP比例的变化可以区分细胞死亡和存活状态。ATP水平的增加和ADP水平的降低表示细胞增殖。相反,ATP水平的降低和ADP水平的增加表示凋亡或坏死细胞,其中在坏死中ATP的降低和ADP的增加比凋亡更为显著。

 

货号 BA0127
名称 ADP/ATP Ratio Assay Kit
方法 化学发光
样本 细胞
用途 测定ADP/ATP比值
应用 细胞凋亡和坏死的测定。

细胞增殖:细胞因子、生长因子、营养物质的作用。

药物发现:抗癌药物的高通量筛选

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