什么是永生化细胞？如何工程化一个永生化细胞系？永生化工作流程概述；细胞系质量控制考虑重点哪些因素。今天我们将围绕这四点重点讲解。
一．什么是永生化细胞？
您可能习惯于使用直接从活体组织中提取的细胞，称为原代细胞。原代细胞的难点在于，每次细胞分裂后，它们的端粒都会缩短，导致细胞进入衰老状态并停止分裂，仅经过几个细胞周期。这意味着如果您正在进行长期项目，您将经常需要不断收获和重新建立新的原代细胞批次。此外，由于不同的收获条件，每个细胞批次都是不同的，这使得可重复性成为一个问题！
永生化细胞（也称为连续细胞或细胞系）是端粒和/或肿瘤抑制基因已经被改变的原代细胞。肿瘤抑制基因（例如p53和Rb）对于在DNA损伤的可能性更高时（即在多个细胞周期后，更多关于细胞周期的信息请访问我们的知识库）向细胞发出停止分裂的信号非常重要。在永生化细胞的情况下，这些基因已经被抑制或其功能被抑制，使细胞能够无限期地继续分裂。
图1 -端粒是DNA的重复区域，形成染色体末端的保护“帽”，保护染色体免受退化。经过每一轮细胞周期，这些端粒会变短，Z终导致细胞进入衰老阶段，细胞停止分裂。
理想的永生化细胞具有与其亲本组织相似的基因型和表型。一些实验室使用相同的永生化细胞数十年，因此，它们的细胞系已经被很好地表征，并为其长期项目提供了一致的基线。Z古老和Z常用的人类细胞系是HeLa细胞系，该细胞系是在20世纪50年代从宫颈癌细胞中建立的！但是，正如您将在本文的质量控制部分看到的，检查细胞系的身份以确保您的细胞系是您认为的那样是非常重要的。
| 优点 | 缺点 | |
| 原代细胞 | 1、与亲本组织有相似的染色体数量
2、具有亲本组织的专门生化特性（生长因子和激素分泌） 3、是体内情况的Z佳实验模型 |
1、有限的寿命/有限的细胞分裂次数
2、种群之间和不同制备之间的相当大的变异 3、在培养中维持起来非常困难（非常“挑剔”）——也更容易受到污染 4、难以获得（供体可用性） |
| 永生化细胞 | 1、倾向于比原代细胞更快地生长，并且可以生长到更高的细胞密度
2、细胞类型统一（大多数是克隆的） 3、相同的供体来源，因此批次间变化较小 4、大多数细胞特性从亲代细胞中得以保留 5、为长期项目节省了金钱和时间 6、适用于体外实验 |
1、细胞在体外培养过程中可能随时间分化
2、体外的细胞行为可能不代表体内情况 3、表型或细胞功能可能发生改变 |
二．细胞永生化策略
那么，您如何工程化一个永生化细胞系呢？有两种主要方法：
方法A：端粒酶逆转录酶蛋白（TERT）表达
TERT蛋白是端粒酶的催化亚基，在大多数体细胞中通常不活跃。在这种方法中，您可以将编码人类端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白的cDNA插入到您感兴趣的原代细胞中。当hTERT被外源性表达时，细胞能够维持足够的端粒长度以避免衰老。这是最近开发用于细胞永生化的方法。
| 优点 | 缺点 |
| 1、对于受端粒长度影响Z大的细胞（例如人类细胞）的永生化效果很好
2、Z不可能引起类似癌症的表型 3、使用此方法生成的细胞系具有稳定的基因型并保留关键的表型标记 |
1、与方法B相比，某些细胞类型的永生化成功率可能不高
2、hTERT的过度表达甚至可以在某些细胞类型（例如上皮细胞）中诱导细胞死亡 3、仅使用这种方法可能不足以成功实现永生化 |
方法B：病毒致癌基因
病毒致癌基因，如SV40病毒的大T抗原或HPV的E6/E7致癌基因，可以通过抑制肿瘤抑制基因（例如p53和Rb）来实现永生化。这种方法比方法A更快地生效，但可能会改变一些细胞的特性。
| 优点 | 缺点 |
| 1、永生化的Z快速途径
2、对于难以永生化的原代细胞（例如上皮细胞）很有用 |
1、可能会改变细胞的特性（例如失去接触抑制，基因组不稳定性，细胞周期检查点的破坏）
2、仅使用这种方法可能不足以成功实现永生化 |
在许多情况下，单独使用方法A和B可能不足以成功实现永生化。最近的研究发现，共同表达hTERT和病毒致癌基因具有更高的成功率，并产生更真实和正常的细胞模型，具有明确定义的遗传背景。
图2展示了正常细胞的典型寿命（绿色箭头）。每次分裂，端粒缩短，直到最终达到所谓的衰老状态，此时细胞停止复制并死亡。通过过度表达或抑制特定基因（例如破坏p53和RB途径），我们可以逆转或抑制端粒缩短，使细胞继续分裂而不达到衰老。
| 试剂 | 机制 | ABM可提供的形式 |
| SV40T Antigen | Suppresion of p53 and Rb genes | Lentivirus, Adenovirus, Retrovirus |
| p53 siRNA | Knockdown of p53 tumor suppression gene | siRNA Lentivirus |
| Rb siRNA | Knockdown of Rb tumor suppression gene | siRNA Lentivirus |
| Ras | Suppression of Rb | Lentivirus |
| C-myc T58A | Suppression of p53 | Lentivirus |
| Bmi1 | Inhibition of p16/Rb pathway | Lentivirus |
| CDK4 | Suppression of p16/Rb pathway | Lentivirus |
| HPV 16 E6/E7 | Inhibition of p16/Rb pathway | Lentivirus |
| EBV | Viral oncogene | - |
| hTERT | Elongation of telomeres | Lentivirus, Adenovirus, Retrovirus |
表1：本表展示了常见的永生化方法。每种机制都涉及破坏图2中显示的复制过程中的关键基因。右列描述了abm的永生化试剂系列中可用的形式。您可以在我们的知识库上阅读有关不同病毒的更多信息。
三．永生化工作流程概述
图3：基本的细胞系永生化工作流程。
4. 细胞系质量控制考虑
太好了！在这个阶段，您已经生成了一个永生化细胞系。但是，在您开始在项目中使用您的细胞系之前，有一些重要的质量控制检查您可以进行，以确保您的细胞系处于完美状态。
A.您的细胞系表征
每次永生化后，您应该始终检查您的细胞是否具有适当的标记，以及细胞的功能，以确保它代表您所使用的原代细胞。当您研究细胞途径时，这一步尤为重要，因为您不希望永生化步骤改变了特定途径、功能或细胞的表型。 例如，如果您计划使用您的细胞进行细胞毒性测定，那么使用您的永生化细胞与原代细胞一起进行细胞毒性测定是个好主意，以确保您新永生化的细胞对刺激的反应与它们的原始细胞相似。
B.传代和转基因表达测试
将您的细胞传代至少30次，以证明转基因已稳定表达，并观察它们的生长速度已提高，密度能力已增加。
C.STR分析
正如本文开头提到的，验证您的细胞系身份至关重要，因为可能会发生交叉污染或种群混合的问题。例如，根据《科学》杂志上发表的一篇论文，广泛用于实验室的著名HeLa细胞被发现污染了许多细胞系，包括Hep-2和INT407细胞系。
识别细胞系的黄金标准是短串联重复（STR）分析。STR分析是一种方法，其中在特定位点的短串联DNA重复与标准参考配置文件进行比较。细胞系的STR分析可以用来确认其身份，定期进行STR分析是个好主意，以确保您的细胞系没有随着时间的推移受到污染。
为了应对细胞系误识别事件，资助机构如NIH现在要求在资助申请中使用的细胞系进行STR分析，许多期刊也开始鼓励这个关键的质量控制检查。
D.支原体和病原体检测
最后，始终测试微生物污染物，如真菌、细菌和支原体是个好主意。特别是支原体，是细胞培养实验室中Z常见的污染物之一。通常很难通过显微镜下的视觉检查来检测支原体。然而，这种细菌可以影响细胞的增殖，改变其基因表达谱，并可能扭曲您的实验结果。有许多试剂盒可用，例如abm的PCR支原体检测和清除试剂盒，可以轻松检测并清除50多种类型的支原体。
我们希望本文能帮助您获得开始您的第一个细胞永生化项目所需的信心！如果永生化过程听起来太麻烦了，不用担心——有许多细胞系库可用，包括abm的500+永生化细胞系和800+独特的细胞系，用于药物发现，全球可用。您可以在这里查看我们的目录或索取免费的实体副本。没有看到您正在寻找的特定细胞系，请查看下方表格（部分产品），或者请随时与abm中国区代理，艾美捷科技联系！400-6800-868，www.amyjet.com
| 货号 | 永生化细胞 | 货号 | 永生化细胞 |
| T0573 | 永生化人晶状体上皮细胞-SV40 | T0165 | 永生化人胰岛衍生前体细胞- Ras |
| T0599 | 永生化小鼠远端附着附睾上皮细胞系（DC2） | T0265 | 永生化犬真皮成纤维细胞- SV40 |
| T0038 | 永生化小鼠Floxed Fam20c成骨细胞 | T0295 | 永生化小鼠雪旺细胞 |
| T9423 | 永生化子宫内膜基质细胞 SV40T/hTERT | T0267 | 永生化犬真皮成纤维细胞- Myc |
| T9427 | 永生化子宫内膜基质细胞 SV40+hTERT | T0565 | 永生化小鼠肠肌成纤维细胞 |
| T0688 | 永生化小鼠肝星状细胞 - SV40 | T0622 | 永生化大鼠后肾间充质前体细胞(KMM) |
| T1074 | 永生化人卵巢上皮细胞-SV40T | T0449 | 永生化小鼠心肌源性祖细胞 |
| T9040 | 永生化毛细血管内皮细胞-SV40 | T0490 | 永生化人肺成纤维细胞系 |
| T0598 | 永生化小鼠近端附睾附睾上皮细胞系（PC1） | T0081 | 永生化胎牛肾细胞- SV40 |
| T3105 | BMP报告永生化（BRITER）细胞系 | T0503 | 永生化人类毛囊毛乳头细胞-SV40T/c-Myc |
| T0251 | 永生化人小胶质细胞 - SV40 | T0608 | 永生化卵巢表面上皮细胞 |
| T1013 | 永生的人二倍体成纤维细胞-Htert | T0319 | 永生化小鼠晚期黑素细胞 |
| T9202 | 永生化成年大鼠海马星形胶质细胞sv40 | T0749 | 永生化Bcl-x小鼠胚胎成纤维细胞- SV40T |
| T9097 | 永生化大鼠视网膜毛细血管内皮细胞 | T0690 | 永生化小鼠MyD88-/-肝星状细胞 |
| T0495 | 永生化小鼠肺上皮细胞(MLE-15) | T0623 | 永生化小鼠系膜细胞- SV40 |
| T0448 | 永生化猪主动脉内皮细胞(AOC) | T3451 | Cas9表达永生化人小胶质细胞-SV40细胞系 |
| T9258 | 永生化小鼠心脏微血管内皮细胞SV40 | T0649 | 永生化小鼠支持细胞 |
| T0446 | 永生化人心脏成纤维细胞 | T0641 | 永生化小鼠远端小管KDT3细胞 |
| T0515 | 永生化人主动脉平滑肌细胞- sv40 | T0544 | 永生化小鼠前脂肪细胞 |
| T0557 | 永生化人冠状动脉平滑肌细胞 | T0280 | 永生化人星形胶质细胞-SV40 |
| T0571 | 永生化人类视网膜细胞 | T3971 | 稳定表达永生化人小胶质细胞SV40细胞系的RFP |
| T0154 | 永生化人乳腺成纤维细胞(HMF3S) | T0640 | 永生化小鼠近端小管KPT11细胞 |
| T9415 | 永生化山羊睾丸细胞- SV40T | T0168 | 永生化人胰腺间充质干细胞 |
| T0026 | 永生化人牙龈成纤维细胞- hTERT | T0504 | 永生化小鼠野生型主动脉内皮细胞 |
| T9223 | 永生化肠平滑肌细胞-SV40+hTERT | T0235 | 永生化小鼠嗅球细胞 |
| T0577 | 永生化人角膜内皮细胞(IHCE) | T0355 | 永生化大鼠胚胎纹状体野生型(121-1I)细胞 |
| T0501 | 永生化毛囊真皮乳头状细胞-hTERT | T0029 | 永生化人类菌状味觉细胞——SV40 |
| T0021 | 永生化人软骨细胞 - SV40 | T0358 | 永生化大鼠中脑(AF5)细胞系- SV40T (T155g) |
| T9254 | 永生化鹅卵巢颗粒细胞 -SV40 | T0016 | 永生化人脐血间充质干细胞 |
| T9249 | 永生化人发生发基质细胞–SV40 | T0344 | 永生化人新生成纤维细胞 |
| T9250 | 永生化人发生发基质细胞–HPV | T0015 | 永生化大鼠心肌细胞 |
| T0457 | 永生化人心肌细胞 - SV40 | T0687 | 永生化犬骨髓间充质干细胞(DS1) |
| T9400 | 永生化人脑膜瘤细胞 -SV40+hTERT | T0048 | 永生化小鼠牙根尖乳头祖细胞 |
| T9403 | 永生化人脑膜瘤细胞-SV40T | T0352 | 永生化犬间充质干细胞-人乳头瘤病毒E6/E7 |
| T9265 | 永生化人正常膀胱平滑肌细胞 (HNBdSMC)-hTERT | T9256 | 永生化人脐静脉内皮细胞-SV40 |
| T9416 | 永生化山羊睾丸细胞- SV40 | T0248 | 永生化大鼠蛛网膜细胞- SV40/hTERT |
| T0764 | 永生化人子宫内膜异位细胞 (12Z) | T0692 | 永生化大鼠下丘脑细胞(RCHT-1) |
| T9402 | 永生化人脑膜瘤细胞- HPV | T0304 | 永生化人类正常皮肤细胞 |
| T9205 | 永生化小鼠膀胱上皮细胞-SV40T | T0017 | 永生化人脐血间充质干细胞 |
| T9206 | 永生化小鼠膀胱上皮细胞-SV40+hTERT | T0575 | 永生化大鼠视网膜前体细胞系 |
| T9215 | 永生化小鼠颈动脉内皮细胞-hTERT | T0693 | 永生化人杜氏肌营养不良症骨骼肌细胞 |
| T9630 | 永生化Cas9 Expressing 人心肌细胞 - SV40 Cell Line | T0606 | 稳定表达LH/CG受体的永生化大鼠类固醇生成颗粒细胞 |
| T9440 | 永生化人子宫内膜基质细胞 SV40T | T0757 | 永生化大鼠胚胎纹状体(M213-1L)细胞 |
| T0014 | 永生化人脐静脉内皮细胞 - SV40 | T0605 | 稳定表达卵泡刺激素受体的永生化大鼠类固醇生成颗粒细胞 |
| T0162 | 永生化人胰岛衍生前体细胞 - SV40 | T0009 | 永生化人椎间盘软骨终板衍生干细胞-SV40 |
| T9437 | 永生化人癌相关成纤维细胞-HPV | T0023 | 永生化人软骨细胞 |
| T9213 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞-SV40+hTERT | T9243 | 永生化人鼻上皮细胞-SV40 |
| T0259 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞 - SV40 | T0039 | 永生化小鼠Floxed Fam20c牙乳头间充质细胞 |
| T0533 | 永生化人子宫内膜基质细胞(HESC) | T3961 | 稳定表达绿色荧光蛋白的永生化人小胶质细胞SV40细胞系 |
| T0277 | 永生化小鼠脑内皮细胞 - hTERT | T0345 | 永生化人表皮角质形成细胞 |
| T0675 | 永生化16三体小鼠神经元细胞 (MTh) | T9230 | 永生化人毛囊内根鞘细胞系 |
| T0491 | 永生化人肺微血管内皮细胞 | T0578 | 永生化人角膜成纤维细胞(IHCF)化人角膜成纤维细胞(IHCF) |
| T9210 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞-hTERT | T9241 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-人乳头瘤病毒 |
| T9214 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞-HPV16-E6/E7 | T9235 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-hTERT |
| T9212 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞-SV40T | T9234 | 永生化人毛囊内根鞘细胞系-人乳头瘤病毒-16 E6/E7 |
| T9219 | 永生化小鼠颈动脉内皮细胞-HPV | T3031 | PARP-1敲除永生化小鼠心脏内皮(HYKO6)细胞系 |
| T9216 | 永生化小鼠颈动脉内皮细胞-SV40 | T0904 | 永生化人皮肤成纤维细胞- HPV E6/E7 |
| T9217 | 永生化小鼠颈动脉内皮细胞-SV40T | T9231 | 永生化人毛囊内根鞘细胞系-SV40 |
| T9218 | 永生化小鼠颈动脉内皮细胞-SV40+hTERT | T0613 | 永生化人近端肾小管细胞 |
| T9211 | 永生化大鼠脑微血管内皮细胞-SV40 | T0236 | 永生化小鼠嗅球细胞(OBC6) |
| T9227 | 永生化人小胶质细胞 -SV40+hTERT | T9245 | 永生化人鼻腔上皮细胞-SV40+hTERT |
| T9221 | 永生化人肠平滑肌细胞-SV40T | T9247 | 永生化人鼻上皮细胞-人乳头瘤病毒-16 E6/E7 |
| T9222 | 永生化人肠平滑肌细胞-HPV16-E6/E7 | T9233 | 永生化人毛囊内根鞘细胞系-SV40+hTERT |
| T9226 | 永生化人小胶质细胞-SV40T | T0403 | 永生化小牛甲状腺细胞-Myc |
| T0034 | 永生化人类骨骼肌细胞 | T9436 | 永生上颌窦粘膜间充质干细胞-SV40 |
| T9228 | 永生化人小胶质细胞-Hpv | T9240 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-SV40T |
| T9220 | 永生化人小肠平滑肌细胞-SV40 | T9237 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-SV40T |
| T9225 | 永生化人类小胶质细胞-SV40 | T0450 | 永生化人乳腺上皮细胞 |
| T1015 | 永生化人肺成纤维细胞 | T0767 | 永生化人牙周膜细胞- hTERT |
| T0520 | 永生化人骨髓间充质干细胞SV40 | T0237 | 永生化小鼠嗅球细胞(OBC13) |
| T0529 | 永生化人骨髓间充质干细胞 | T9252 | 永生化人成骨细胞(HNOB)-RAS V12 |
| T9305 | 永生化小鼠细胞系SV40T的永生化下丘脑神经元 | T0024 | 永生化人软骨细胞- Ras |
| T0682 | 永生化人类神经干细胞-Myc | T9239 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-SV40+hTERT |
| T9301 | SV40永生化人类乳腺叶状肿瘤 | T0258 | 永生化小鼠胚胎囊性纤维化成纤维细胞-Ras |
| T9302 | 永生化人类乳腺叶状肿瘤 | T9236 | 永生化人前列腺平滑肌细胞-SV40 |
| T9303 | 人乳头瘤病毒永生化人类乳腺叶状肿瘤 | T0290 | 永生化小鼠脑毛细血管内皮细胞(cEND) |
| T9304 | 小鼠永生化下丘脑神经元细胞系-SV40+SV40T | T0102 | 永生小鼠肝窦内皮细胞- SV40 |
| T9433 | 永生化人胰腺基质细胞-(3359)-hTERT+SV40 | T9201 | 永生化人子宫内膜基质细胞-SV40 |
| T9430 | 永生化人胰腺基质细胞-(3223)-端粒酶逆转录酶+SV40 | T0579 | 永生化人角膜角质形成细胞(IHCK) |
| T9435 | 永生化人类癌症相关成纤维细胞-SV40 | T9260 | 永生猪巨噬细胞(含成纤维细胞)-SV40 |
| T9431 | 永生化人胰腺基质细胞系(3223)-hTERT+SV40T | T0421 | 永生化人甲状腺细胞-SV40 |
| T0470 | 永生化人间皮细胞系-SV40 | T9261 | 永生化猪巨噬细胞(含成纤维细胞)-MYC |
| T9434 | 永生化人胰腺基质细胞(3359)-hTERT+SV40T | T0528 | 永生化小鼠树突状细胞(MutuDC1940) |
| T0558 | 永生化人肺动脉平滑肌细胞 | T0447 | 永生化人主动脉内皮-SV4 |
| T0164 | 永生化人胰岛衍生前体细胞-Myc | T0607 | 永生化小鼠前列腺上皮细胞 (iMPEC) |
| T0462 | 永生化人黑素细胞 | T0268 | 永生化犬真皮成纤维细胞- Ras |
| T0677 | 永生化MS-/-小鼠肺泡巨噬细胞 | T9262 | 永生化猪巨噬细胞(含成纤维细胞) -HPV |
| T0486 | 永生化人支气管上皮细胞- SV40 | T9251 | 永生化人成骨细胞 (HNOB) -SV40T |
| T0062 | 永生化小鼠kupffer细胞 | T0281 | 永生化人星形胶质细胞，胎儿 - hTERT |
| T0047 | 永生化小鼠成牙骨质细胞 | T9232 | 永生化人毛囊内根鞘细胞-SV40T |
| T0068 | 永生化大鼠门静脉肌成纤维细胞(RGF) | T0523 | 永生化人骨髓间充质细胞 – hTERT |
| T0044 | 永生化人牙周膜成纤维细胞- SV40 | T0513 | 永生化人头臂动脉内皮细胞 - SV40 |
| T0137 | 永生化小鼠髓样来源抑制样(HD1A)细胞 | T0514 | 永生化人心脏微血管内皮细胞 - SV40 |
| T0163 | 永生化人胰岛衍生前体细胞 | T1096 | 永生化人胎儿肾脏细胞 - E6/E7 |
| T0463 | 永生化人类黑素细胞-SV40和hTERT | T0487 | 永生化人肺泡细胞 |
| T0570 | 永生化人结肠细胞 | T0510 | 永生化人颈动脉平滑肌细胞 - SV40 |
| T0227 | 永生化小鼠颅缝细胞 | T9263 | 永生化幼鸭肠上皮细胞 - SV40 |
| T0129 | 永生化小鼠胚胎肝祖细胞 | T9441 | 永生化人胰腺成纤维细胞-SV40 |
| T0245 | 永生化大鼠肠胶质细胞(EGC) | T0158 | 永生化人胰腺细胞–Myc |
| T0084 | 永生化马肾脏细胞 | T0276 | 永生化小鼠脑内皮细胞 -SV40 |
| T0010 | 永生化小鼠关节软骨细胞(iMAC) | T0019 | 永生化小鼠颅骨间充质祖细胞(iCALs) |
| T0133 | 永生化人类淋巴母细胞-EBV(KMS-15) | T9264 | 永生化小鼠心脏微血管内皮细胞 -SV40+hTERT |
| T0035 | 永生的小鼠跟腱细胞(iMAT) | T9259 | 永生化小鼠心脏微血管内皮细胞 HPV |
| T0082 | 永生化婴儿肾上皮细胞系 | T0370 | 永生化大鼠视网膜细胞 (E1A-NR.3) |
| T0069 | 永生化大鼠门静脉肌成纤维细胞(RGF-N2) | T0532 | 永生化人滋养层细胞 - hTERT (Sw.71) |
| T0466 | 永生化小鼠黑素细胞 | T0720 | 永生化小鼠真皮乳头细胞(iDP6) |
| T0318 | 永生化小鼠祖细胞样黑素细胞(iMC23) | T0493 | 永生化人支气管平滑肌细胞 |
| T0371 | 永生化人原代小梁网细胞系-SV40 | T0456 | 永生化人间皮细胞 (HPV E6E7) |
| T0500 | 永生化毛囊真皮乳头细胞系-SV40 | T9268 | 永生化人脂肪下皮细胞 (HNSA)-SV40Tt |
| T0373 | 永生化小鼠视网膜细胞系(MU-PH1) | T0732 | 永生化人颌下腺细胞 |
| T0530 | 永生化人胎盘上皮细胞-SV40 | T0596 | 永生化（有条件）大鼠黄体细胞（GG-CL） |
| T0101 | 永生化小鼠肝细胞-SV40 | T0597 | 永生化（有条件）大鼠蜕膜细胞（GG-AD） |
| T0167 | 永生化人胰腺间充质干细胞-SV40 | T0357 | 永生化大鼠胚胎纹状体（M26-1F）细胞 SV40T |
| T0581 | 永生化人类总肝细胞群 | T0691 | 永生化人髓核细胞 - hTERT |
| T0320 | 永生化小鼠中间分化成黑素细胞 | T0540 | 永生化人脂肪来源基质细胞-Bmi-1 / hTERT |
| T0132 | 永生化人类淋巴母细胞-EBV(KMS-9) | T0729 | 永生化布朗前脂肪细胞 (PAZ6) |
| T0170 | 永生化人胰腺间充质干细胞-Ras | T0632 | 永生化人食管上皮细胞（NE2-hTERT） |
| T0289 | 永生化小鼠星形胶质细胞- SV40T(IMA2.1) | T0247 | 永生化小鼠小胶质细胞 |
| T0243 | 永生化小鼠神经胶质细胞 | T0006 | 永生化人胎儿成骨细胞系 - SV40 |
| T0266 | 永生化犬真皮成纤维细胞 | T9098 | 永生化大鼠视网膜Muller细胞系-SV40T |
| T0274 | 永生化犬真皮成纤维细胞 | T9203 | 永生化小鼠膀胱上皮细胞-hTERT |
| T0025 | 永生化人牙龈成纤维细胞-SV40和hTERT | T9204 | 永生化小鼠膀胱上皮细胞-SV40 |
| T0033 | 永生化人骨骼肌成肌细胞 | T9207 | 永生化大鼠肺微血管内皮细胞-SV40 |
| T0574 | 永生化小鼠视网膜色素上皮细胞系- HPV16 E6/E7 | T9208 | 永生化大鼠肺微血管内皮细胞-hTERT |
| T0524 | 永生化成人骨髓基质细胞- SV40 | T9209 | 永生化大鼠肺微血管内皮细胞-SV40+hTERT |
| T0286 | 永生化小鼠施万细胞 | T9405 | 永生化乳腺叶状肿瘤细胞-SV40 |
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