体内实验,PDX/CDX 异种移植:高浓度基质胶

基质胶作为一种重要的细胞外基质,具有广泛的应用价值。它可以用于各种研究领域,如细胞生物学、组织工程、肿瘤研究等。基质胶的特殊成分和结构为细胞提供了理想的生长环境,促进细胞的黏附、迁移和增殖。同时,基质胶还可以模拟人体组织的结构和功能,为研究人员提供了重要的工具。

高浓度基底膜基质胶在细胞培养和研究中有广泛的应用。它为各种实验提供了理想的基质环境,如体内实验,PDX/CDX 异种移植和肿瘤成瘤模型的实验等。通过使用高浓度基底膜基质胶,研究人员可以更好地模拟体内细胞与基质之间的相互作用,进一步了解细胞行为和组织发育的机制。

高浓度基底膜基质胶的应用非常灵活。可以使用厚层凝胶法或薄层包被法将基质胶涂覆在培养表面上,具体操作可根据实验需求进行选择。该产品经过严格的质量认证,确保无病原体污染,并通过多种实验验证其生物功能。

无论您是进行细胞培养、组织工程研究还是肿瘤研究,Biogradetech基质胶都是您的理想选择。它为您的实验提供了可靠的3D培养基质支持,帮助您更好地理解细胞行为和组织发育的奥秘。立即尝试高浓度的基质胶,开启您的细胞研究新篇章!

 

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产品货号 英文名称 中文名称 应用类型
A-MGL24 HC Basement Membrane Matrix (For in vivo experiments, PDX and CDX) 高浓度,基质胶(体内实验,PDX/CDX 异种移植) 蓝海领域:3D培养,类器官培养,干细胞培养

产品英文名称:HC Basement Membrane Matrix (For in vivo experiments, PDX and CDX)

产品中文名称:高浓度,基质胶(体内实验,PDX/CDX 异种移植)

货号:A-MGL24

规格:5mL、10mL

储存条件:≤-20°C

 

产品描述:

Biogradetech货号A-MGL24高浓度的基质胶是一种连续的特殊细胞外基质薄膜,形成了内皮细胞、上皮细胞、肌肉细胞或神经细胞与其相邻基质之间的界面。基质胶在发育和伤口愈合过程中会被降解和再生。它不仅支持细胞和细胞层,还对组织结构起着重要作用,影响细胞的粘附、迁移、增殖和分化。基质胶能够成为转移性肿瘤细胞侵袭的主要屏障。

Biogradetech货号A-MGL24高浓度的基质胶是从Engelbreth-Holm-Swarm(EHS)肿瘤中纯化得到的可溶性基质胶。此高浓度的基质胶在37°C下形成重组基底膜基质胶。高浓度的基质胶的主要成分包括层粘连蛋白、IV型胶原、粘连素和肝素硫酸酯蛋白聚糖。

 

适用范围:

该系列分为标准型高浓度和低生长因子高浓度,其浓度和粘度均高于普通浓度的基质胶,更适合于体内实验(动物模型),如PDX、CDX、体内血管生成测定等。

 

产品参数:

  1. 来源:小鼠肿瘤;
  2. 颜色:含酚红的基质胶呈黄粉色,无酚红的基质胶呈半透明淡黄色;
  3. 形态:标准型基质胶在4°C下溶解为透明液体;高浓度基质胶在0°C下溶解后为透明液体,长时间放置于4°C后会半凝胶化。
  4. 浓度:蛋白质浓度范围为8至26 mg/mL。
  5. 内毒素:≤ 4.5 EU/mL
  6. 凝胶时间:室温下5-30分钟凝胶,当温度从22°C升至37°C时,凝胶形成速度加快。

 

包被涂层方法:

打造成功的细胞培养环境,关键在于选择合适的基质胶。其中,基质胶的包被涂层方法对于不同的应用需求有所不同。下面,我们将介绍基质胶的包被涂层步骤,帮助您轻松应对各种细胞培养挑战。

首先,让我们来了解一下基质胶的解冻过程。将Biogradetech货号A-MGL24高浓度的基质胶在2-8°C的冰箱中过夜解冻。由于冰箱温度可能有所不同,因此建议在解冻过程中将基质胶放在冰上保持低温,以防止过早凝胶化。解冻后的基质胶在15°C以上的温度下会迅速凝固,因此在使用时要保持冰上状态,以避免不必要的凝胶形成。

Biogradetech货号A-MGL24高浓度的基质胶有许多应用场景,需要不同的厚度和浓度。例如,用于内皮细胞形成类似毛细血管的结构(管状结构形成实验)、大鼠主动脉组织分化为类似毛细血管的结构(主动脉环形成实验)、上皮器官样结构形成或肿瘤器官样结构形成,需要较厚的凝胶,也就是厚层凝胶法。而一些应用,如原代细胞的传代培养,需要薄层涂层而不是厚凝胶,因此应采用薄层凝胶法。

 

厚层凝胶法:

  1. 按上述方法解冻基质胶;
  2. 缓慢上下移液将基质胶混匀,注意不要引入空气泡;
  3. 向细胞培养板表面加入200-300μL/cm2基质胶,平铺均匀,注意避免产生气泡;
  4. 将培养板放置在 37 ℃,等待 30 min 形成凝胶即可使用。

 

薄层包被法:

  1. 按上述方法解冻基质胶;
  2. 缓慢上下移液将基质胶混匀,注意不要引入空气泡;
  3. 根据实验需求使用预冷的培养基稀释。建议将基质胶稀释为1:100以用于原代细胞的扩增。对于您的应用,可能需要经验性地确定最佳涂层浓度;
  4. 加入适量体积的该溶液覆盖整个细胞培养板表面。建议加入300μL/cm2的溶液;
  5. 将培养板放置在室温,孵育至少1h;
  6. 吸去上清即可使用。不要让涂层表面干燥。

 

通过以上步骤,您可以根据不同的细胞培养需求,灵活选择适合的基质胶涂层方法。无论是厚凝胶还是薄层涂层,都能为您的细胞研究提供稳定的3D培养支持,助您取得优异的实验结果。赶快尝试基质胶涂层方法,提升您的细胞培养实验效果吧!

 

实验操作示例:小鼠皮下肿瘤形成

  1. 设备、试剂和耗材

1.1 设备:生物安全柜,细胞培养箱,低温卧式离心机,倒置显微镜;

1.2 试剂:基质胶(货号: A-MGL21 / A-MGL23 / A-MGL24 / A-MGL26 ),基础培养基,含有10%胎牛血清的培养基,1×PBS,胰蛋白酶溶液;

1.3 耗材:无菌移液器枪头、10cm细胞培养皿、无菌EP管、一次性注射器和其它耗材(或根据实验设计进行调整)。

 

  1. 实验内容和方法

2.1. 将Biogradetech货号A-MGL24高浓度的基质胶放入冰盒中,在4°C的冰箱中慢慢解冻过夜;

2.2. 选择生长状况良好且呈对数生长的细胞,弃去上清液,加入2 mL 1×PBS溶液轻轻洗涤,弃去液体;

2.3. 在培养皿中加入1 mL 0.25%胰蛋白酶细胞消化液,静置10秒钟,弃去胰蛋白酶,用残留的胰蛋白酶在室温下继续消化1~3分钟;

2.4. 当细胞变圆(请记住,不能消化到细胞边缘清晰时),加入1 mL含有10%胎牛血清的培养基终止消化。小心地吹散细胞,将细胞悬浮液收集到15 mL塑料离心管中;

2.5. 以1000 rpm离心3分钟,弃去上清液。用PBS洗涤细胞一次后,通过加入无血清基础培养基重新悬浮细胞,并取10 µL细胞悬液进行细胞计数;

2.6.

HepG2细胞:每只小鼠接种500万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为300 μL;

HCT-116细胞:每只小鼠接种100万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为300 μL;

MIA-PaC-2细胞:每只小鼠接种1000万个细胞。根据细胞密度,将所需的细胞悬液放入无菌的1.5 mL塑料离心管中,以1000 rpm离心3分钟。弃去上清液,加入无血清培养基或PBS,直到总体积为500 μL;

2.7. 基质胶的混合:将细胞悬液与基质胶以1:1的比例在4°C下混合;

2.8. 皮下注射:左手将裸鼠固定住,右手将细胞悬液皮下注射到裸鼠的右背部。在接种过程中,将针头稍微插入皮下,约深1cm,以减少注射后细胞悬液从注射点溢出,注射体积为100 μL。MIA-PaC-2细胞注射200 μL/个;

2.9. 数据记录:将裸鼠放回笼子继续饲养,根据实验要求定期测量肿瘤体积,记录数据并绘制曲线,在肿瘤体积小于2000 mm3之前,安乐死裸鼠,取出肿瘤并拍照记录。

 

Biogradetech是生命科学和医药研发行业关键原料与试剂的领先供应商。他们提供广泛的产品组合,包括细胞生物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液分析和高通量药物筛选等领域的试剂。Biogradetech的产品受到全球生物研究机构和生物制药公司的高度追捧,他们以高质量、可靠性和服务而闻名。

Biogradetech成立于2015年,总部位于美国加利福尼亚州,早期以产品技术研发服务起家,逐步发展了广泛的产品线,并将其商业化销售,包括蛋白质、抗体、酶、培养基、试剂盒和仪器。其产品均在严格的全球标准下生产,Biogradetech还提供专业的技术支持,帮助客户选择正确的产品,并正确使用产品。Biogradetech致力于为客户提供高质量的产品和服务,是那些寻求高质量试剂和可靠结果的人值得信赖的合作伙伴。

为了更好地满足亚太地区客户的需求并提升交付速度,Biogradetech在香港设立现货中心,将能更迅速地满足客户的需求,确保订单的高效处理,并加速产品的交付和配送,从而提供更快速、可靠的服务。

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