GST包涵体增溶复性试剂盒,告别透析,调pH!

还在做漫长的透析,调pH...想要表达生产点GST融合蛋白,怎么就这么难?

 

众所周知,GST标签是由211个氨基酸组成,大小约为26KDa,作为一种高度可溶的蛋白,能增加外源蛋白的可溶性,提高表达量,而被广泛应用于重组蛋白表达以及亲和纯化实验中。尽管有这些优点,但GST标签融合蛋白依旧无法避开包涵体的噩梦!

 

包涵体蛋白复性过程

Fig.1 常规包涵体蛋白复性过程

 

如何击破GST融合蛋白包涵体的问题,目前常规的的常规流程是:收菌破碎--洗涤--变性溶解(尿素等)--复性。而复性板块中的稀释和透析不仅慢,而且无法满足大规模的蛋白生产需求。

 

作为专业的生命科学医药原料供应商,艾美捷科技为您推荐:专为GST融合蛋白高效高溶解性而设计的产品,GST包涵体快速溶解与复性试剂盒

 

快速GST包涵体增溶和复性试剂盒旨在在裂解和提取程序后以可溶性形式回收表达的GST融合蛋白。 每个试剂盒均包含足以溶解和复性多达5-10L细菌培养物的试剂。

CellBiolabs

产品 Rapid GST Inclusion Body Solubilization and Renaturation Kit
GST包涵体快速溶解与复性试剂盒
货号 AKR-110
说明书下载 点击下载
FAQ 点击查阅
保存条件 室温保存
试剂盒组分 1. 10X STE Buffer:120 mL
2. Detergent Solubilization Solution: 60 mL
3. Detergent Neutralization Solution:60 mL

*** 该产品仅用于科研实验.

 

  • GST包涵体快速溶解与复性试剂盒的优势:
  1. 专为GST包涵体设计和优化
  2. 节省时间:无需冗长的透析或稀释步骤,仅需2h
  3. 使用便捷:不涉及pH值变化和氧化还原
  4. 大规模生产:每个Kit满足5-10 L的细菌培养液

 

GST包涵体快速溶解与复性试剂盒

Fig.2 GST包涵体快速溶解与复性试剂盒-实验流程

 

GST包涵体快速溶解与复性试剂盒

Fig.3 GST包涵体快速溶解与复性试剂盒-结果展示

 

 

  • Cell文章鉴赏:

Campion, Carole G et al. "COMMD5/HCaRG Hooks Endosomes on Cytoskeleton and Coordinates EGFR Trafficking". Cell reports vol. 24,3 (2018): 670-684.e7. doi:10.1016/j.celrep.2018.06.056

【摘要】COMMD5/HCaRG 参与组织修复,其低表达与致瘤性有关。细胞生长、迁移和分化由 COMMD5 控制。我们之前报道过 COMMD5 通过调节 ErbB 成员的表达或磷酸化来抑制肾癌细胞的生长。在这里,我们证明 COMMD5 对细胞骨架的稳定性至关重要。它的沉默导致肌动蛋白和微管网络的重大重组。 COMMD5 的 N 末端与内体 Rab5 结合,其 C 末端(包括 COMMD 结构域)与细胞骨架支架结合。 COMMD5 参与长程内体转运,包括表皮生长因子受体 (EGFR) 再循环,并提供变形的强度并协助囊泡断裂成分选内体。该研究建立了 COMMD5 作为衔接蛋白协调内体运输的分子机制,并揭示了其在 EGFR 运输和活性中的重要作用。

 

COMMD5/HCaRG 参与组织修复

 

COMMD5/HCaRG 参与组织修复

 

已发表文章:

  • Gao, Q. et al. (2019). Purification of insoluble GST-fused and GST-cleaved Cav1.2 channel fragment by denaturation and renaturation. Protein Expr Purif. 160:7-10. doi: 10.1016/j.pep.2019.03.013.
  • Campion, C.G. et al. (2018). COMMD5/HCaRG Hooks Endosomes on Cytoskeleton and Coordinates EGFR Trafficking. Cell Rep. 24(3):670-684.e7. doi: 10.1016/j.celrep.2018.06.056.
  • Wang, H. et al. (2017). Truncated protein tyrosine phosphatase receptor type O suppresses AKT signaling through IQ motif containing GTPase activating protein 1 and confers sensitivity to bortezomib in multiple myeloma. Oncotarget. 8(69):113858-113873. doi: 10.18632/oncotarget.23017.
  • Hamel, V. et al. (2017). Identification of Chlamydomonas Central Core Centriolar Proteins Reveals a Role for Human WDR90 in Ciliogenesis. Curr Biol. 27(16):2486-2498.e6. doi: 10.1016/j.cub.2017.07.011.
  • Dixon, J. E. et al. (2016). Highly efficient delivery of functional cargoes by the synergistic effect of GAG binding motifs and cell-penetrating peptides. Proc Natl Acad Sci U S A. 113:E291-E299.
  • Matsuoka, T. et al. (2014). Expression and characterization of honeybee, Apis mellifera, larva chymotrypsin-like protease. Apidologie. doi:10.1007/s13592-014-0313-2.
  • Keller, D. et al. (2014). Mechanisms of HsSAS-6 assembly promoting centriole formation in human cells. J. Cell Biol. 204:697-712.
  • Lalani, S. et al. (2013). MCTP2 is a Dosage-Sensitive Gene Required for Cardiac Outflow Tract Development. Hum. Mol. Genet. 10.1093/hmg/ddt283.
  • Sabbah, M. et al. (2011). CCN5, A Novel Transcriptional Repressor of Transforming Growth Factor-ß Signaling Pathway. Mol. Cell. Biol. 10.1128/MCB.01316-10.

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文章来源:透析?调pH?GST融合蛋白包涵体增溶复性方案!

 

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