B细胞FluoroSpot检测——免疫球蛋白的有力检测工具

上一章我们学习了B细胞ELISpot分析，这一章我们继续深入，学习B细胞FluoroSpot分析。复习Mabtech畅销特色B细胞ELISpot检测工具

B细胞FluoroSpot

B细胞FluoroSpot是在ELISpot基础上发展起来的新方法，但不是用酶促反应来检测，而是用荧光检测。它继承了ELISpot高灵敏度的特性，并具备多重检测的能力，能同时检测几个分析物，特别适用于细胞数量较低时的检测。

B细胞FluoroSpot是对分泌的免疫球蛋白进行直接检测的有力工具。可用来直接计数抗体分泌细胞（ASCs）和长期记忆B细胞。相对于常用的细胞流式而言，B细胞FluoroSpot能在十万个细胞中实现对单个抗原特异性B细胞进行定量检测，因而具有极高的灵敏度。并且由于其具备多重检测的能力，因此能研究多种抗原并定义免疫球蛋白亚群。B细胞FluoroSpot的主要应用包括检测B细胞对感染和疫苗接种引起的反应。

具体步骤：

1.预包被。单克隆捕获抗体或抗原加入到经乙醇处理的PVDF膜板上；

2.细胞孵化。细胞被加入到孔板中，并分泌抗体。

3.捕获抗体。分泌抗体就近被预包被的抗体或抗原捕获；

4.检测。加入荧光标记的检测抗体，直接检测。

5.斑点计数（可人工计数，也可用自动读板仪计数），数据处理，结果分析。

应用

1.抗原可以直接连接到一个荧光基团或重组表达的蛋白标签（如WASP，GAL），并以带抗体标签的共轭抗体进行检测。这就实现了在一个孔板中分析多种抗原。

2.分泌抗体就近被预包被的抗体或抗原捕获，并用荧光标记的共轭检测抗体检测分泌抗体，从而实现定义免疫球蛋白亚群。

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【品牌介绍】

Mabtech公司于1986年创办于瑞典，是一家欧洲的集研究，开发，销售，技术支持为一体的高科技免疫生物技术公司。Mabtech公司始终专业致力于研发新的单克隆抗体，生产创新的免疫试剂和销售高品质的全配套的免疫试剂盒。公司核心业务是致力于优化发展酶联免疫斑点法技术 (ELISpot)、荧光免疫斑点法技术 (FluoroSpot) 和酶联免疫吸附试验技术 (ELISA) 等免疫学方法。公司开发和生产多种针对细胞因子，免疫球蛋白和载脂蛋白的单克隆抗体，用于生命科学研究中的体外应用。Mabtech的试剂盒可用于研究感染性疾病，癌症，过敏，移植等免疫反应，通常用作疫苗试验中的监测工具。此外，还生产用于兽医和心血管研究的试剂盒。

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