细胞外囊泡(EV)染色试第一弹：ExoBrite™ 细胞外囊泡(EV)染色试剂盒。
细胞外囊泡(EV)染色试第一弹：EXOBRITE CTB EV染色试剂盒
1.Exobrite流式抗体偶联物：
常用的细胞外囊泡(EV)标记蛋白是CD9、CD63和CD81，它们都是四白蛋白家族的成员。虽然针对这些蛋白质的抗体可通过商业供应商获得，但很少有抗体被验证或用于检测EV或外泌体。设计并验证了用于流式细胞术的ExoBrite Flow Antibody偶联物，在纯化和串珠结合的EV中提供明亮的信号和低背景的EV标记物。ExoBrite 同型对照流式抗体已被发现不与人类细胞中的任何靶标发生反应，并且与tetraspanin抗体具有相同的同型。
ExoBrite流式抗体的优势:
- 开发用于流式细胞仪检测EV标记CD9, CD63和CD81
- 纯化的珠状结合EV验证
- 明亮信号和低背景
- ExoBrite同型对照流式抗体
- 多种颜色可用，于Pacific Blue, FITC和PE通道
结果展示：
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| SEC纯化的A549衍生EVs用ExoBrite™ 650/665 CD9流式抗体染色（左），与缓冲液中的相同抗体相比，可以看到特异性染色（右），在APC通道中的CytoFLEX-LX流式细胞仪上检测到外泌体。 |
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| SEC纯化的MCF-7衍生EVs用ExoBrite™ 560/585 CD63流式抗体染色（左），与缓冲液中的相同抗体相比，可以看到特异性染色（右），在PE通道中的CytoFLEX-LX流式细胞仪上检测外泌体。 |
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| SEC纯化的MCF-7衍生EVs用ExoBrite™ 410/450 CD81流式抗体染色（左），与缓冲液中的相同抗体相比，可以看到特异性染色（右），在Pacific Blue通道中的CytoFLEX LX流式细胞仪上检测到外泌体。 |
相关产品推荐：
| 产品名称 | 偶联物 | 检测通道 | 规格 | 货号 |
| ExoBrite™ CD9 Flow Antibody | ExoBrite™ 410/450 ExoBrite™ 490/515 ExoBrite™ 560/585 ExoBrite™ R-PE |
Pacific Blue ™ FITC PE |
25 tests 100 tests |
P003-410… P003-RPE |
| ExoBrite™ CD63 Flow Antibody | P004-410… P004-RPE | |||
| ExoBrite™ CD81 Flow Antibody | P005-410… P005-RPE | |||
| ExoBrite™ IgG1 Isotype Control Flow Antibody | P008-410… P008-RPE |
使用ExoBrite Streptavidin磁珠简化EV和外泌体分离工作流程，与同类产品相比，该磁珠可提供更低的背景和更高的EV捕获灵敏度。这些链霉亲和素包被和磁性聚苯乙烯珠(直径4.5um)可用于从细胞培养基或其他生物流体中分离EV，而无需过夜沉淀步骤。
ExoBrite 亲和素磁珠的优点:
- 结合生物素化抗体(不包括)分离EV，
- 无需过夜沉淀步骤从生物体液中分离EV，
- 比竞争对手更低的背景和更高的灵敏度方便的磁分离，
- 通过显微镜，流式细胞术或western blot检测下游
结果展示：
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| 首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD9抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 | 首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD63抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。结合的EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 |
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| 首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD81抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CD9流式抗体染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 | 首先将ExoBrite™ 链霉亲和素磁珠与（橙色点）或不与（灰色点）生物素化的CD81抗体一起孵育，然后与浓缩的MCF-7细胞上清液一起孵育。EV被ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色，并通过流式细胞仪在PE通道中检测。 |
相关产品推荐：
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| ExoBrite Streptavidin Magnetic Beads | 5mL | 28000 |
3.ExoBrite超分辨率成像
由于外泌体和EVs的体积小和光学显微镜的分辨率限制，通过成像来表征它们仍然是一个挑战。超分辨率显微镜技术，如直接随机光学重建显微镜（dSTORM），超越了传统光学显微镜的衍射极限，允许对EVs等亚细胞结构进行单分子分辨率。
ExoBrite™ STORM CTB EV染色剂是为EV的STORM成像而开发的，有四种经过STORM验证的CF®染料可供选择。ExoBrite™ 560/585已经在ONI纳米成像仪S Mark II上验证了dSTORM，从而可以研究精细的形态学细节，并与EV生物标志物（如四跨蛋白CD9、CD63和CD81）共染色。
ExoBrite的优势™ STORM CTB EV染色：
- 深入了解EV的形态和结构
- 用于STORM成像EV的最佳配方CTB偶联物
- 有4种CF®染料可用于STORM成像
- 允许与EV生物标志物进行抗体共染色和定位研究
结果展示：
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| 人类结直肠癌细胞系衍生EVs的超分辨dSTORM图像。EVs用抗tetraspanin抗体（抗CD9/CD63/CD81混合物，均与CF®647缀合，显示为品红色）和1X ExoBrite染色™ 560/585（青色）。使用ONI的EV Profiler试剂盒制备样品，并使用来自ONI（Oxford Nanoimaging, UK）的纳米成像仪s Mark II获取样品。使用ONI基于云的数据分析平台CODI的测试版来处理数据。比例尺为500 nm（缩小，左侧），单个EV面板为50 nm（右侧）。图片由ONI提供。 |
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| 产品名称 | Ex/Em (nm) | 激光(s) (nm) | 检测通道 | 规格 | 货号 |
| ExoBrite™ STORM CF®505 CTB EV Staining Kit | 505/519 | 488 | FITC | 100 Labelings | 30115-T |
| 500 Labelings | 30115 | ||||
| ExoBrite™ STORM CF®583R CTB EV Staining Kit | 583/609 | 555 or 561 | Rhodamine or Texas Red® |
100 Labelings | 30116-T |
| 500 Labelings | 30116 | ||||
| ExoBrite™ STORM CF®647 CTB EV Staining Kit | 652/668 | 633-640 | Cy®5 | 100 Labelings | 30117-T |
| 500 Labelings | 30117 | ||||
| ExoBrite™ STORM CF®680 CTB EV Staining Kit | 681/698 | 633-640 | Cy®5.5 | 100 Labelings | 30118-T |
| 500 Labelings | 30118 |
4.Exobrite Western Blot抗体偶联物
ExoBrite™ 通过近红外荧光蛋白质印迹验证了蛋白质抗体在EV提取物中提供明亮的信号和低背景的EV标记物CD9、CD63和CD81。抗体有两种近红外荧光染料ExoBrite™ 680/700和ExoBrite™ 770/800，其提供比用于蛋白质印迹的具有可见光发射的染料更大的信噪比。
ExoBrite Calnexin WB抗体可检测内质网中不存在的一种蛋白质。作为评价EV提取物纯度的阴性对照。
ExoBrite™ WB抗体的优势：
- 开发用于通过荧光蛋白质印迹检测EV标记物CD9、CD63和CD81
- 经验证可与EV提取物一起使用
- 明亮的信号和低背景
- 有两种近红外颜色可选
- 阴性对照ExoBrite™ Calnexin WB可用
结果展示：
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| 用ExoBrite™680/700 CD9蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD9进行Western检测，显示CD9在EV制剂中富集。 | 用ExoBrite™680/700 CD63蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD63进行Western检测，显示CD63在EV制剂中富集。 |
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| 用ExoBrite™ 680/700 CD81蛋白抗体对MCF-7细胞和EV裂解物中人CD81进行Western检测，显示EV制剂中CD81的富集。 | 用ExoBrite™ 770/800 calnexin WB抗体检测MCF-7细胞和EV裂解物中的人钙蛋白酶，显示EV制剂中缺乏calnexin。 |
相关产品推荐：
| 产品名称 | 偶联物 | 规格 | 货号 |
| ExoBrite™ CD9 Western Antibody | ExoBrite™ 680/700 ExoBrite™ 770/800 |
25 tests 100 tests |
P003-680, P003-770 |
| ExoBrite™ CD63 Western Antibody | P004-680, P004-770 | ||
| ExoBrite™ CD81 Western Antibody | P006-680, P006-770 | ||
| ExoBrite™ Calnexin Western Antibody | ExoBrite™ 770/800 | P007-770 |
Biotium公司是一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司，公司位于美国加利福尼亚的BAY AREA------世界上首要的生物科技中心。该公司一直致力于开发和生产用于生物医学研究的荧光指示剂及其他特殊生化产品。其产品被广泛应用于细胞生 物学、蛋白质组学、分子生物学、免疫学、微生物学、诊断学、生物化学、神经科学、血液流动检测及大规模药物筛选等众多领域。Biotium公司专利产品众多，包括已经被广泛使用的实时PCR定量荧光染料EvaGreen、具有划时代意义的凝胶核酸染料Gel Red和GelGreen，以及最新推出的Cheetah Taq热启动酶和CF系列蛋白质标记染料等。
目前，Biotium已将其许多专利技术授权给一些主要的国际生物技术公司，包括安捷伦、BD生物科学、Biolegend、BioRad、EMD Millipore、Illumina、PerkinElmer、Qiagen、Roche、Sartorius AG、Sigma-Aldrich、Thermo Fisher Scientific等。 宝天生物科技(BTProbes)由美国知名荧光试剂企业Biotium公司于2007年在华成立，是一家专注于生物荧光试剂研发的高科技企业，是多家欧美企业长期供货商，产品被广泛应用于生命科学各个领域。目前宝天可提供超过100款热卖的荧光蛋白(PE, APC)，其他荧光原料（FITC），用于PCR荧光原料（5-FAM，6-TAMRA）等。
作为Biotium在中国的区域总代理，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的Biotium的产品。
