EZMeta™ 线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性检测试剂盒

线粒体呼吸链复合体Ⅰ(EC 1.6.5.3)又称 NADH-CoQ 还原酶或 NADH 脱氢酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体中,是线粒体内膜中最大的蛋白复合物。该酶催化一对电子从 NADH 传递给 CoQ,同时可使 O2 还原生成 O2-,是呼吸电子传递链上产生 O2-的主要部位。测定该酶活性,不仅可以反映呼吸电子传递链(ETC)状态,而且可以反映活性氧(ROS)生成状态。

 

EZMeta™ 线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性检测试剂盒(微量法)可检测生物体内线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性,其原理是线粒体呼吸链复合体Ⅰ(简称复合体Ⅰ) 能够催化 NADH 脱氢生成 NAD+,在 340 nm 下测定 NADH 的氧化速率计算出该酶活性的大小。可测动、植物组织和细胞样本。

 

【产品基本信息】

特点&优势:

  • 测定植物组织、动物组织、细胞等样品中复合体Ⅰ的酶活性检测。
  • 提供了详细的样品制备和结果计算方法。

货号:D-AKC1850

规格:48T / 96T

适用样本:动植物组织和细胞

储存:-20℃,避光保存6个月

 

使用中注意事项

  • 不同批次号、不同厂家之间的组分不要混用;否则,可能导致结果异常。
  • 混合或复溶组分时,避免产生气泡。
  • 勤换吸头,避免各组分之间的交叉污染。
  • 实验开始前,确保所有的组分及设备处于合适的温度。
  • 为保证实验结果的准确性,需先取 1-2 个样做预实验,如果测定的吸光值过高(高于 1.5)或ΔA大于 0.4,可用Reagent Ⅱ稀释样本后再测定,计算结果时注意乘以稀释倍数。若ΔA 偏小,则可以通过增加加入的样本体积来提高灵敏度。
  • 样本蛋白浓度需自行测定。

 

【常见问题(FAQ)】

该试剂盒操作步骤中的匀浆这一步可以用超声仪超声破碎代替吗?

可以超声破碎,参考超声条件为:冰浴超声波破碎 5 min(功率20%,超声3 s,间隔7 s,重复30次)。

 

这个产品中的的检测板必须要用96孔UV板吗?

是的,需要用96孔紫外板,因为要测的波长340 nm不是可见光,是紫外的,所以要用紫外板测。

 

若在实验过程中,取出来的沉淀线粒体来不及测, 要怎么保存呢?

将上清和沉淀一起保存至负80度,注意分装,避免反复冻融。建议尽量使用新鲜样本进行实验。

 

该试剂盒的检测原理是什么?

线粒体呼吸链复合体Ⅰ能够催化NADH脱氢生成NAD+,直接读取340nm下NADH的氧化速率从而计算出该酶活性的大小。

 

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