基于细胞的Cell-Based ELISA检测试剂盒,Biomatik解决方案

 

基于细胞的ELISA(cell-based ELISA)是一种新的定性蛋白检测技术,细胞直接在微孔板里培养,待检测时,不需裂解细胞便可直接测量微孔板里的蛋白变化,有利于检测目标细胞蛋白经刺激或抑制作用后的表现。由于省去抽提蛋白和裂解细胞的步骤,样本的损失也能降到最低,比起其他普通的ELISA测定方法,Cell-Based ELISA检测技术能更快速、更方便地一次检测大量的细胞内蛋白。

 

Cell-Based ELISA和双夹心ELISA的比较
Cell-Based ELISA 夹心ELISA
固定相(包被物) 完整细胞 可溶性抗原
样本类型 细胞悬液,、粘附细胞及非粘附细胞 体液、血浆、血清、细胞裂解液及组织培养上清夜
应用 定性 定量

 

Cell-Based ELISA优势

无需裂解细胞,只需将细胞及蛋白质原位固定

降低蛋白质发生降解的可能性,目标蛋白损失最少;

可测定粘附细胞还有非粘附细胞;

整个操作在96孔板中进行,容易实现高通量样本的检测;

对于磷酸化蛋白研究,可同时检测磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白水平,实现磷酸化蛋白水平的准确评估,结果比WB更可靠

 

Cell-Based ELISA检测原理(如下图):将细胞种到96孔板上,经刺激或者抑制处理后,对细胞进行固定透化(方便抗体进入细胞内), 接着分别加入一抗和二抗孵育、显色,最后测量信号。

 

Cell-Based ELISA检测原理 

 

Biomatik可提供用于检测磷酸化以及非磷酸化靶标的基于细胞ELISA(Cell-Based ELISA)的检测试剂盒。

 

基于非磷酸化靶标细胞的ELISA试剂盒

 

基于非磷酸化靶标细胞的ELISA试剂盒方案

基于非磷酸化靶标细胞的ELISA试剂盒方案

1) 细胞单层在96孔微量滴定板中培养。然后可以用兴奋剂、抑制剂等处理每个孔。然后固定和封闭细胞。

2) 加入抗原特异性一抗,与细胞表面的靶抗原结合。

3) 洗涤孔并加入与一抗结合的HRP标记的二抗。

4) 洗涤孔并加入含有TMB的溶液。TMB与HRP 发生反应,从无色变为蓝色。然后加入酸终止溶液,反应停止,蓝色变为黄色。

 

基于磷酸化特异性细胞的 ELISA 试剂盒方案

基于磷酸化特异性细胞的 ELISA 试剂盒方案

1) 细胞单层在96孔微量滴定板中培养。然后可以用兴奋剂、抑制剂等处理每个孔以诱导磷酸化靶标的表达,然后将细胞固定并封闭。

2) 加入磷酸化特异性或泛特异性一抗,与细胞表面的靶抗原结合。

3) 洗涤孔并加入与一抗结合的HRP标记的二抗。

4) 洗涤孔并加入含有TMB的溶液。TMB与HRP发生反应,从无色变为蓝色。然后加入酸终止溶液,反应停止,蓝色变为黄色。

 

部分热销产品

名称 货号 种属
Claudin 2 Cell-Based ELISA Kit EKA50124 人, 小鼠
GR Cell-Based ELISA Kit EKA50259 人, 小鼠, 大鼠
Guanylate Cyclase β Cell-Based ELISA Kit EKA50267 人, 小鼠, 大鼠
HDAC6 Cell-Based ELISA Kit EKA50277 人, 小鼠
Histone H2A.X Cell-Based ELISA Kit EKA50285 人, 小鼠, 大鼠
ICAM-1 Cell-Based ELISA Kit EKA50301
Merlin Cell-Based ELISA Kit EKA50377 人, 小鼠, 大鼠
Met Cell-Based ELISA Kit EKA50378 人, 小鼠, 大鼠
MYC Cell-Based ELISA Kit EKA50410 人, 小鼠, 大鼠
Nrf2 Cell-Based ELISA Kit EKA50427 人, 小鼠, 大鼠
Phospho-AMPKα (Thr172) Cell-Based ELISA Kit EKA50967 人:T183/172, 小鼠:T183/172, 大鼠:T183/172
Phospho-NF-κB p105/p50 (Ser927) Cell-Based ELISA Kit EKA50983 人:S927, 小鼠:S930
Phospho-Smad3 (Ser425) Cell-Based ELISA Kit EKA50992 人:S425, 小鼠:S425, 大鼠:S425
Phospho-BTK (Tyr223) Cell-Based ELISA Kit EKA51006 人:Y223, 小鼠:Y223, 大鼠:Y224
Phospho-PLCG1 (Tyr783) Cell-Based ELISA Kit EKA51028 人:Y783, 小鼠:Y783, 大鼠:Y783
Phospho-ETS1 (Thr38) Cell-Based ELISA Kit EKA51101 人:T38, 小鼠:T38, 大鼠:T38
Phospho-FGFR1 (Tyr654) Cell-Based ELISA Kit EKA51104 人:Y654, 小鼠:Y654, 大鼠:Y561
Phospho-IRF-3 (Ser385) Cell-Based ELISA Kit EKA51112 人:S385
Phospho-MYPT1 (Thr853) Cell-Based ELISA Kit EKA51126 人:T853, 小鼠:T852, 大鼠:T855
Phospho-p90 RSK (Thr359+Ser363) Cell-Based ELISA Kit EKA51135 人:T359/S363, 小鼠:S352/T348, 大鼠:S363/T359
Phospho-p90 RSK (Ser380) Cell-Based ELISA Kit EKA51136 人:S380, 小鼠:S369, 大鼠:S380

 

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来源;Biomatik基于细胞的Cell-Based ELISA检测试剂盒

 

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