值得信赖的细胞外囊泡(EV)工具——EXOBRITE™ CTB EV染色试剂盒

细胞外囊泡(EV)染色试第一弹：ExoBrite™ 细胞外囊泡(EV)染色试剂盒。

值得信赖的细胞外囊泡(EV)工具——EXOBRITE™ CTB EV染色试剂盒

ExoBrite™ CTB EV染色试剂盒旨在克服外泌体检测的一些挑战。ExoBrite™ CTB EV染色剂与外泌体膜中的分子结合，通过流式细胞术对分离的 EV 进行明亮、特异性的染色。ExoBrite™ 染色剂的一个关键优势在于，与许多其他染料不同，它们几乎没有显示出与外泌体或 EV 大小相似的背景聚集体。此外，与大多数膜染料不同，ExoBrite™ 染料不会非特异性结合聚苯乙烯珠，这意味着它们可用于染色珠结合的外泌体。

ExoBrite™ CTB EV染色剂已在流式细胞术中得到验证，因为它们能够染色来自几种不同培养细胞系的外泌体和 EV，并通过几种不同的方法分离，包括尺寸排阻色谱 (SEC)、聚乙二醇 (PEG) 沉淀和磁珠免疫沉淀 (IP)。

ExoBrite™ CTB EV染色剂的优势：

• 专为通过流式细胞术检测外泌体而设计
• 明亮的荧光和低背景可实现出色的信噪比
• 兼容抗体共染色（不同于CellBrite® Fix 或MemBrite® Fix）
• 染色纯化或珠结合的外泌体
• 提供4种颜色，用于灵活的实验设计

使用 ExoBrite™ CTB EV 染色剂对SEC纯化的MCF-7衍生外泌体进行染色。

与其他外泌体/EV 染色剂相比，背景更少，覆盖率更好：

与其他经典染料或竞争染料相比，ExoBrite™ CTB EV 染色剂具有更少的背景和更完整的外泌体染色。使用尺寸排阻色谱 (SEC) 从 MCF-7 细胞上清液中纯化外泌体。纯化的外泌体在 PBS 中用指定的染料染色（顶行）。外泌体群体被门控，数字显示落入外泌体门内的颗粒百分比。每种染料也被添加到过滤的 PBS（底行）中，以寻找染料聚集和非特异性背景。红色箭头表示这些染料聚集体。像 DiO 这样的亲脂性染料显示出大量与外泌体大小相似的颗粒，这使得它们不适合外泌体染色。CellMask™ 还显示落在外泌体门内的染料聚集量不可接受。

ExoBrite™ 490/515 CTB EV染色用于染色SEC纯化的、Jurkat衍生的EV或人工脂质体。EVs染色牢固，但脂质体未染色。本实验中的脂质体由Presome®ACD-1制备，并使用亲脂性染料di-8-ANNEPS验证其大小和浓度与EV相似（数据未显示）。在CytoFLEX流式细胞仪上进行分析，其中从405nm激光检测到SSC，并且ExoBrite™ 在FITC通道中检测到。Presome®是日本NIPPON FINE CHEMICAL CO., LTD的注册商标。

SEC纯化的MCF-7衍生EVs首先用100uL的ExoBrite™ 490/515 CD9染色，然后是10X ExoBrite™ 560/585 CTB EV染色。在CytoFLEX-LX流式细胞仪上在FITC和R-PE通道中检测EV。当我们关闭ExoBrite™ 560/585个CTB阳性颗粒中，约95%也对CD9呈阳性。

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