原代细胞计数技术

原代细胞计数技术:

1、准备计数板:用酒精清洁计数板及专用盖玻片,然后轻轻拭干。

2、制备细胞悬液:用消化液分散单层培养细胞或直接收集悬浮培养细胞,制成单个细胞悬液。要求细胞密度不低于104/ml,胞数很少,应将悬液离心(1000rpm,2分钟),重悬浮于少量培养液中。

3、加样:用习惯轻吹打细胞悬液,取少许细胞悬液,在计数板上盖玻片的一侧加微量细胞悬液。

4、计数:计算计数板四大格细胞总数,压线细胞只计左侧和上方的。然后按下式计算: 细胞数/ml=4大格细胞总数/ 4×10000。

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