油脂水解试验

一、简介

微生物对大分子的淀粉、蛋白质和脂肪不能直接利用,必须靠产生的胞外酶将大分子物质分解才能被微生物吸收利用。胞外酶主要为水解酶, 通过加水裂解大的物质为较小的化合物,使其能被运输至细胞内。 如淀粉酶水解淀粉为小分子的糊精、双糖和单糖;脂肪酶水解脂肪为甘油和脂肪酸; 蛋白酶水解蛋白质为氮基酸等。

二、操作方法

油脂水解试验

三、原理

脂肪水解后产生脂肪酸可改变培养基的 pH, 使 pH 降低, 加入培养基的中性红指示剂会使培养基从淡红色变为深红色,说明胞外存在着脂肪酶。

四、材料与仪器

芽孢杆菌 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 铜绿假单胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)固体油脂培养基

无菌平皿 接种环和接种针

五、步骤

1. 将溶化的固体油脂培养基冷至 50℃ 左右时,充分振荡,使油脂均匀分布,无菌操作倒入平板,待凝。

2. 用记号笔在平板底部划成四部分,分别标上菌名,

3. 将枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,钢绿假单胞菌分别用无菌操作划十字接种于平板的相对应部分的中心。

4. 将平板倒置,于 37℃ 温箱中培养 24 h。

5. 取出平板,观察菌苔颜色,如出现红色斑点,说明脂肪水解,为阳性反应。

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注意事项

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常见问题

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