一、简介
细菌形态学检查在临床微生物学检验工作中更重要体现在标本直接制片染色显微镜下观察，对于感染性疾病病原体的诊断有重要的意义。
二、操作方法
芽胞染色法
三、原理
芽胞(Spore)是细菌的休眠状态，对各种理化因素有强大的抵抗力，能耐受恶劣环境的影响。芽胞折光性很强，可经特殊染色法染色后，在光学显微镜下观察。本实验要求学生了解两种特殊染色法并认识这种细菌特殊构造。
材料与仪器
破伤风杆菌孔雀绿水溶液 花红水溶液 铬酸水溶液 石碳酸复红染 硫酸 美蓝染液载物玻片 显微镜
步骤
一、威-康(Wiltz-Conkln)二氏芽胞染色法1. 材料破伤风杆菌（Clostridium tetani）24 h琼脂斜面纯培养物， 3%孔雀绿水溶液， 0.5%花红水溶液， 载物玻片。2. 方法（1）取破伤风杆菌培养物涂膜、干燥、火焰固定。（2）滴加3%孔雀绿水溶液加热染色3～6 min，水洗。（3）0.5%花红水溶液复染0.5～1 min，水洗，干燥，镜检。3. 结果观察芽胞染成绿色，菌体染成红色。注意芽胞的形状、在菌体中的位置和大小(与菌体横径比较)。同时可能看到没有芽胞的繁殖体和失掉菌体的芽胞。二、Moeller氏芽胞染色法经火焰固定的细菌涂片，以5%铬酸水溶液处理2~10 min，充分水洗。用石碳酸复红染液加热染色1 min，水洗。用5%硫酸水短时间脱色(约5 s)，立即水洗。再用美蓝染液染色半分钟，水洗，吸干，镜检。结果芽胞染成红色，菌体染成蓝色。芽胞(Spore)是细菌的休眠状态，对各种理化因素有强大的抵抗力，能耐受恶劣环境的影响。芽胞折光性很强，可经特殊染色法染色后，在光学显微镜下观察。本实验要求学生了解两种特殊染色法并认识这种细菌特殊构造。
材料与仪器
破伤风杆菌孔雀绿水溶液 花红水溶液 铬酸水溶液 石碳酸复红染 硫酸 美蓝染液载物玻片 显微镜
步骤
一、威-康(Wiltz-Conkln)二氏芽胞染色法1. 材料破伤风杆菌（Clostridium tetani）24 h琼脂斜面纯培养物， 3%孔雀绿水溶液， 0.5%花红水溶液， 载物玻片。2. 方法（1）取破伤风杆菌培养物涂膜、干燥、火焰固定。（2）滴加3%孔雀绿水溶液加热染色3～6 min，水洗。（3）0.5%花红水溶液复染0.5～1 min，水洗，干燥，镜检。3. 结果观察芽胞染成绿色，菌体染成红色。注意芽胞的形状、在菌体中的位置和大小(与菌体横径比较)。同时可能看到没有芽胞的繁殖体和失掉菌体的芽胞。二、Moeller氏芽胞染色法经火焰固定的细菌涂片，以5%铬酸水溶液处理2~10 min，充分水洗。用石碳酸复红染液加热染色1 min，水洗。用5%硫酸水短时间脱色(约5 s)，立即水洗。再用美蓝染液染色半分钟，水洗，吸干，镜检。结果芽胞染成红色，菌体染成蓝色。
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