斜面低温保藏法(菌种保藏实验)

一、简介

菌种保藏是使微生物种子经过长时间的保存后,仍尽可能地保持其原来性状和活力不变异不死亡、不被污染的过程。保藏的菌种可作为鉴别菌株的对照株,菌种保藏可 深入研究某菌株的未知性状, 随时为生产、科研提供优良菌种。

二、操作方法

斜面低温保藏法

三、原理

微生物具有容易变异的特性,因此,在保藏过程中,必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态,才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。选用优良菌株,根据生理生化特征创造一个低温环境使其处于休眠状态或者代谢处于最低的状态,生长繁殖受抑制从而降低变异率。此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法,优点是操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,屡次传代会使微生物的代谢改变,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多。

材料与仪器

细菌 酵母菌 放线菌 霉菌肉膏蛋白胨斜面培养基 灭菌水冰箱 油纸 试管 试管塞 酒精灯 超净工作台 灭菌锅

步骤

一、将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2-8℃的冰箱中保藏。二、保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月,移种一次。酵母菌两个月,细菌最好每月移种一次。

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