人支气管上皮细胞 BEAS-2B

一．产品简介

1、细胞名称：BEAS-2B；人支气管上皮细胞

2、生长特性：贴壁

3、细胞生长条件：

培养条件DMEM(高糖）+10%FBS+1%双抗

温度37℃

空气条件5% CO2，,95% AIR

传代方法1:2 传代，2~3 天换液

冻存条件90%FBS+10%DMSO

4、背景资料：从一位非癌个体的正常人支气管上皮病理切片分离出上皮细胞。这些细胞用腺病毒12-SV40 病毒杂交病毒感染并克隆。DEAS-2B 细胞保留了对血清反应进行鳞关分化的能力，并有用于筛选诱导或影响分化及致癌的化学或生物制剂。细胞角蛋白及 SV40 抗原染色阳性。

二．使用方法

1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：

取出25cm2培养瓶，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2

细胞培养箱中静置3-4小时以稳定细胞状态，然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用

PBS清洗细胞一次；2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，再轻轻吹打细胞使之脱落，然后将悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）弃上清，沉淀细胞用12ml完全培养基重悬，然后按1:2比例进行分瓶传

代，最后放入37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；

4）待细胞完全贴壁后，观察培养结果，之后进行换液培养或传代。

3、细胞冻存：

1）细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃25cm2培养瓶中的培养液，用

PBS清洗细胞一次；

2）添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中，倒置显微镜下观察，待

细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化，轻轻吹打细胞使之脱落，然后将

悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；

3）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；

4）先将细胞冻存管放置于-20℃1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转

入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。

4、细胞复苏：

1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃

水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；

2）将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中，1000rpm

离心5min；

3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2

细胞培养箱中培养；

4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。

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