慢病毒转染贴壁细胞实验方法

1.提前一天细胞铺板

提前一天种植细胞，以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整，不要采用过高的细胞密度)。

⑴将Envirus^TM-LV用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成增强剂稀释液。

⑵将病毒浓缩液用无血清稀释液稀释(用量参见下表)，充分混匀，制成病毒稀释液。

注：由于病毒浓度情况不同，具体病毒浓缩液用量酌情依据常规用量，建议进行和增强剂配合的梯度实验。

⑶将增强剂稀释液和病毒稀释液充分混合，4℃静置15分钟。

⑷上述混合液加入到含完全培养基的细胞上，37℃培养8小时后观察细胞状态，如没有明显变化，不要更换培养基，继续培养24小时后常规更换培养基。由于慢病毒感染较慢，一般在感染96小时后观察结果。

表1 不同细胞培养容器推荐用量

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