1． 在冰上配制反应混合液：
2 μ l 10 ×菌落 PCR 缓冲液
1.2 μ l 25mmol/L MgCl2
0.4 μ l 10mmol/L dNTPs
10pmol 引物（每一种引物）
0.2 μ lTaqDNA 聚合酶（ 5U ）
加水到总体积为 20 μ l
2． 用移液器加微量细胞（约 0.25 μ l ）到 PCR 反应混合液中（ 20 μ l 反应体积）
3． PCR 循环参数：
94 ℃ 4 分钟
94 ℃ 1 分钟
55 ℃ 1 分钟
72 ℃ 2 分钟
35 个循环
72 ℃ 10 分钟
4． 上全部样品进行琼脂糖电泳。
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