一、简介
细菌的鞭毛很纤细，其直径通常为 0.01 ~0.02 μm， 所以，除了很少数能形成鞭毛束（由多根鞭毛构成）的细圈可以用相差显微镜直接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，而只能用电子显微镜观察。要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。
鞭毛染色方法很多，本实验介绍硝酸银染色法和改良的 Leifson 氏染色法，前一种方法更容易掌握，但染色剂配制后保存期较短。
二、操作方法
改良 Leifson 氏染色法
三、原理
鞭毛染色的基本原理，是在染色前先用媒染剂处理含使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。
四、材料与仪器
苏云金芽孢杆菌 假单胞菌 金黄色葡萄球菌Leifson 氏鞭毛染色液 0.01％ 美蓝水溶液载玻片 盖玻片 凹载玻片 无菌水 凡士林 显微镜
五、步骤
1. 载玻片的准备 菌种材料的准备同硝酸银染色法。
2. 制片
用记号笔在载玻片反面将玻片分成 3～4 个等分区。在每一小区的一端放一小滴菌液。将玻片倾斜，让菌液流到小区的另一端，用滤纸吸去多余的菌液。室温或 37 ℃ 温室自然干燥。
3. 染色
加 Leifson 氏染色液覆盖第一区的涂面，隔数分钟后，加染液于第二区涂面，如此继续染第三四区。间隔时间自行议定，其目的是为了滴定最佳染色时间。在染色过程中仔细观察，当整个玻片都出现铁锈色沉淀、染料表面现出金色膜时，即直接用水轻轻冲洗（不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清），染色时间大约 10 min，自然干燥。
4. 镜检
干后用油镜观察。
菌体和鞭毛均呈红色。
六、注意事项
1. 玻片要求光滑、洁净，尤其忌用带油迹的玻片（将水滴在玻片上。无油迹破片水能均匀散开）。
2. 挑菌时，尽可能不带培养基。
3. 不要先倾去染料再冲洗。否则背景不清。
七、常见问题
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