动物胚胎冷冻保存技术-动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法

简介

动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法,是常规缓慢冷冻方法的改进,由于快速冷冻过程中细胞在保护剂中平衡时间短,胞内容易造成冰晶的积聚,因此该方法目前应用较少。

材料与仪器

器材:

0.25 mL 细管、冷冻仪、液氮罐。

试剂:

①甘油 ;

②PBS ;

③PBSS(含 20%NCS 的 PBS)。

步骤

动物胚胎冷冻保存技术快速冷冻法的基本过程可分为如下几步:

A. 先将胚胎在一定浓度的保护剂中预先脱水。

B. 然后迅速降温至 0 °C 平衡 10 分钟,再于-7 °C 植冰。

C. 当温度降至-40~-25 °C 时,将胚胎立即投入液氮中保存。

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