亚硫酸氢钠修饰DNA的目的是将DNA序列中未甲基化的胞嘧啶完全转化为尿嘧啶，而甲基化的5一甲基胞嘧啶保持不变。影响此过程的主要因素有修饰试剂的浓度、反应温度、反应环...
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差异性甲基化杂交(DMH)
1. 微阵列构建 （1）基因组片段化：将雄性个体（雄性个体包括完整的染色体，即含有Y染色体）基因组DNA经MseI消化（MseI识别位点为TTAA，可以保证富含Cp...
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基因组非特异性甲基化水平的研究
1. 3H―SAM掺入后液闪检测法 （1）将约2 μg 基因组与足量3H标记的SAM，甲基化酶（SssⅠ或HpaⅡ）共同温育，SAM的甲基化基团将被掺人到目的DNA...
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PCR操作时应注意的事项
PCR检测微量感染因子时，容易因为污染的而导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现...
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RT2 Profiler PCR Arrays新手小技巧及注意事项
以下是做了几百次PCR Array的Matt Finley博士的经验之谈：RNA纯化和分析:起始RNA样品的质量是成功实验的最重要的因素之一。我强烈推荐使用QIAG...
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Overlap PCR（重叠PCR）的基本原理
Overlap PCR（重叠PCR）重叠PCR的应用是非常广泛的，他的原理其实很简单：比如说有两个基因或者说一个启动子和一个基因，你要将他们连接到一 起，我们首先想...
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巢式PCR(Nested PCR)定义、原理和步骤
巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引物称...
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7年分子克隆经验总结
做了快7年的分子克隆，从加样加不好，到现在轻松PCR，我想分子生物学这块还是有很多经验可以分享一下的。或许很多人会说分子克隆过程中出现问题最多的大概就是连接了，大家...
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PCR一般步骤
(一)总RNA提取取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。 (1)加T...
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PCR 扩增常见问题及特点
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚至消失。假阴性，不出现扩增条带。PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②...
