生物知识 电泳迁移实验(EMSA)方法 1. 探针的标记:(1) 如下设置探针标记的反应体系:待标记探针 (1.75pmol/微升) 2微升T4 Polynucleotide Kinase Buffer ... 05月09日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白大小与纯度的鉴定 原理聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺(Acrylamide简称Acr)和交联剂甲叉双丙烯酰胺(N,Nˊ-MethyleneBisacrylamide,简称Bis),在催化... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 一、试验目的了解并掌握垂直板凝胶电泳的使用方法。二、实验原理聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳,由于此种凝胶具有分子筛的性质,所以本法... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 核酸蛋白转移电泳及杂交 一、DNA Southern Blot及杂交本技术可用于基因组DNA特定序列定位,尤其可分析某些基因的限制性内切酶长度多态性,对遗传性疾病的早期基因诊断、产前诊断或... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 电泳切胶小窍门 电泳切胶注意事项:1.电泳的buffer和gel都是新制的,切胶的台子清理干净,刀片最好洗净灭菌,总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。2.切胶是要把整个目... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白质二维电泳技术原理简介 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳 技术结合了等电聚焦技术(根据蛋白质等电点进行分离)以及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(根据蛋白质的大小进行分离)。这两项技术结合形成的二维电... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 专家点评:如何预防双向凝胶电泳中的水平条纹 在此我们着重讨论了水平条纹的原因和预防。在对任何双向条纹问题进行问题排查时,必须记住两件事:1)水平条纹是由第一向(等电聚焦或IEF)中的不完全聚焦引起的,而2)垂... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 蛋白质电泳-在蛋白质组学中的应用 原 理 蛋白质分子 在溶液中由于其末端氨基、末端羧基及侧链的游离基团而成为带电颗粒,并可在电场内移动,其移动方向取决于蛋白质分子所带静电荷。不同蛋白质分子根据其氨基... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳试剂准备与操作步骤 一、原理细菌体中含有大量蛋白质,具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用,通过加热使蛋白质解离,大量的SDS结合蛋白质,使其带相同密度的负电荷,... 05月08日 发表评论 阅读全文
生物知识 Native-PAGE电泳的注意事项 1. 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 的过程中,蛋白质的迁移率不仅和蛋白质的等电点有关,还和蛋白质的分子量以及分子形状有关,其中蛋白质的等电点是最重要的影响因子,要根据蛋... 05月08日 发表评论 阅读全文